基因工程的基本作程序 2.docVIP

高二生物导学案 课题： 专题一 基因工程 第2节 基因工程的基本操作程序 授课时间： 预习案 学习目标： 1.简述基因工程的原理及其操作程序。 2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。 教材助读： 思考：基因工程操作流程有哪些步骤？ 一、目的基因的获取 （1）从基因文库中获取目的基因 ① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导人受体菌的群体中 ，各个受体菌 分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一种生物的 基因 ② 种类 cDNA文库：含有一种生物的 基因 ③ 目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ① PCR：是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。 ②原理： ③ 条件：已知目的基因的 序列。 ④过程：目的基因DNA受热形成 ，与 结合，然后在 ____的作用下进行延伸形成DNA。 ⑤方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数） 思考： PCR技术和DNA复制有何异同？ PCR技术 DNA复制 相同点 原理 原料 条件 不 同 点 解旋方式 场所 酶 结果 （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 二、基因表达载体的构建——基因工程的核心 1、表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等。 2、启动子：位于基因的 ，它是 结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 3、终止子：位于基因的 ，终止 。 思考：起始密码子、终止密码子与启动子、终止子的区别？ 4、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 给下一代；使目的基因 ____和发挥作用。 5、标记基因： 受体细胞是否含有目的基因。 6、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。 三、将目的基因导入受体细胞 （一）转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和 的过程。 （二）方法： 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 受体细胞 转化过程 以农杆菌转化法为例：目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 目的基因表达载体 →取卵（受精卵） →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的 内发育→新性状动物。 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ ___ 细胞吸收DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 1．检测（1）方法：标记了的 、抗原抗体杂交。 （2）内容① 检测转基因生物染色体的DNA是否插入 。 ② 检测目的基因是否转录 。 ③ 检测目的基因是否翻译成 。 2．鉴定： 鉴定、抗病鉴定等。 预习自测： 1.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因，正确的操作顺序是 （　 ）　　A．③②④① 　　B.②④①③ 　C．④①②③ 　D．③④①② 2.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是 （ ） 　　A．人工合成基因 　　　　 　B．目的基因与运载体结合　　C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测和表达 3. 有关基因工程的叙述正确的是 （　 ）　　A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用　　B.重组质粒的形成在细胞内完成　　C.质粒都可作运载体　　D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4.不属于目的基因与运载体结合过程的是 （ ） A．用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 B．用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端　　C. 将重组DNA导入受体细胞中进行扩增　　D．将切下的目的基因插入