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基因工程的基本作程序(教案)
姓名 刘红 单位 枣庄一中
E-mail liuhong0102@163.com
课时课题:1.2 基因工程的基本操作程序(第一课时)
课型:新授课
授课时间: 2013 年 3 月 6 日,星期 三 ,第 3、4 节课
一、教学目标
1、 知识目标
⑴简述基础理论研究和技术进步催化了基因工程
⑵简述基因工程的原理和基本步骤
2、 能力目标
⑴学会运用概念图总结基因工程的基本步骤及方法
⑵尝试运用基因工程原理,提出解决某一实际问题的方案
3、 情感态度与价值观
⑴关注基因工程的发展
⑵认同基因工程的应用促进生产力的提高
二、教学重点与难点
1、 教学重点:?
基因工程基本操作程序的四个步骤(前两个步骤)
2、 教学难点:
⑴从基因文库中获取目的基因
⑵利用PCR技术扩增目的基因
(3)原核生物与真核生物基因结构的异同
三、考试点:
1、获取目的基因的方法
2、基因表达载体的构建方法及步骤
四、能力点:
1、基因组文库与CDNA文库的构建方法
2、基因表达载体的组成部分及各部分的作用
五、课前准备:
1、学生的学习准备:完成学案课前预习部分,提出疑惑
2、教师的教学准备:导学案、多媒体课件
②人工方法合成
2、方法:(一)可从基因文库中获取目的基因。
引出基因文库概念,基因文库的分类,用打比方等手段帮助学生理解“基因文库”、“基因组文库”“部分基因文库”
若一个基因文库中包含了一种生物所有的基因,那么这种基因文库就叫做基因组文库,若只包含了一种生物的一部分基因就叫做部分基因文库。
那么,怎样从基因文库中得到我们所要的目的基因呢?
可根据目的基因的有关信息来获取目的基因,如根据基因的核苷酸序列,基因在染色体上的位置等特性来获取目的基因。
基因文库又要如何构建呢?
基因组文库的构建及cDNA文库的构建过程:
对上述两种文库进行比较
除了从基因文库中获取目的基因,还可以利用PCR技术扩增目的基因。
(二)利用PCR技术扩增目的基因。
1、概念:PCR是聚合酶链式反应的缩写,是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
2、原理:
3、前提:一对引物
(结合课本,重点讲解,理解引物的化学本质及作用)
4、条件:
5、过程:
a.变性( ℃):目的基因DNA受热变性后接连为单链
b.退火( ℃): 与单链相应互补序列结合
c.延伸( ℃):在 的作用下进行延伸
Taq酶的特点是 。
多媒体演示过程并结合书本,学会描述扩增的过程。
知识延伸:
PCR技术与DNA复制的比较:
PCR技术
DNA复制
相
同
点
原理
原料
条件
不
同
点
解旋方式
场所
酶
结果
(三)化学法直接合成
若基因比较小,核苷酸序列又已知,可通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
该过程需要模板吗?
(不需要)
作为基因工程表达载体,只需含目的基因就可以完成任务吗?为什么要有“表达载体”的构建这一步骤?
可使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。
一个基因表达载体有哪些结构组成的呢?
共同归纳:基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子以及标记基因等。
什么是启动子、终止子?它们的作用是什么呢?
启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因,转录出mRNA最终获得所需要的蛋白质。
终止子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
标记基因的作用是什么呢?
(3)标记基因:鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而把含目的基因细胞筛选出来。
学案上的相关习题:
1.下列不属于获得目的基因的方法的是
A.利用DNA连接酶复制目的基因B.利用DNA聚合酶复制目的基因
C.从基因文库中获取目的基因 D.利用PCR技术扩增目的基因
2.根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法是
A.用DNA探针测出目的基因 B.用mRNA探针测出目的基因
C.用mRNA反转录形成目的基因 D.用PCR技术扩增mRNA
3.在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是 :
A.用mRNA为模板逆转录合成DNA
B.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成
C.由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA
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