检验医学专业实IV 临床微生物学检验部分.docVIP

细菌形态学检查 一、不染色标本检查（压滴法 【操作方法】 1、用接种环取大肠杆菌菌液2-3环，置于洁净载玻片中央。 2、取一张洁净盖玻片从菌液一边缓缓放下，覆盖于菌液上，避免菌液中产生气泡。 3、先用低倍镜找到观察部位，再换高倍镜观察细菌的运动。 【结果观察】 有动力：可看到细菌自一处移至另一处，有明显的方向性位移 无动力：细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变 二、革兰染色法 【步骤】：制片、染色、镜检 1、制片 涂片 ：取洁净载玻片一张，用接种环取生理盐水2环，置于玻片上，接种环灭菌后，取细菌培养物少许与盐水混匀，并涂成均匀薄膜涂片。如用液体材料，如痰、尿液、脓汁等可直接涂片，不必加生理盐水。 干燥 ：涂片最好在室温下自然干燥，必要时可将标本面向上，小心间断地在弱火高处烘干，但切勿紧靠火焰将涂膜烤枯。 固定：涂片干燥后，将标本片在酒精灯上快速的来回通过三次，共约2s～3s，注意温度不可太高，以涂片涂膜的反面触及皮肤觉轻微烫觉即可。 固定目的：①杀死细菌；②使菌体与玻片粘附较牢，在染色时不致被染液和水冲掉；③菌体蛋白变性易着色。 2、染色 结晶紫初染 1 min → 卢戈氏碘液媒染 1 min → 95％酒精脱色 30sec～1 min → 稀释石炭酸复红复染 1 min，油镜观察 【原理】： ①革兰阳性细菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易渗入；革兰阴性