生物工程分析与检测 第八章 色谱分析法第一节 概述 层析法也称色谱法,是1906年俄国植物学家Michael Tswett发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子,各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开,由此得名为“色谱法”(Chromatography) 。 其它名称:层析法、色谱法、层离法等。 原理:利用混合物中组分的物理(大小、带电荷的多少) 化学(置换反应) 、生物学性质的差异,使各组分以不同程度分布在两相中。 2.色谱的基本分类 层析形式:纸层析、气相色谱、高压液相色谱、薄层层析、亲和层析、凝胶层析、离子交换层析等。 色谱分析中的相:液相、气相、油相、水相。 固定相, 流动相 当流动相流过含有样品的固定相时,各组分以不同速度移动,从而达到互相分离。 固定相:可以是固体,也可以是以被固体或凝胶所支持的液体,可以装入柱中,也可以为薄层或薄膜。 流动相:液体,气体。 层析过程中包括吸附与分配平衡,溶解与析出等到平衡。 2. 层析法分类 按两相所处的状态分 液相色谱(含液液色谱、液固色谱) 气相色谱(含气液色谱、气固色谱) 按固定相使用形式分 柱层析 纸层析 薄层层析 按分离过程的原理分 分配层析 吸附层析 离子交换层析 凝胶层析 亲和层析 3. 色谱法的应用 1、分离混合物:一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物,一般应用化学方法分离很困难
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