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专题八 生物技术实践（新课标） 【考纲点击】 1、微生物的分离和培养。 2、某种微生物数量的测定。 3、培养基对微生物的选择作用。 4、利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。 5、运用发酵加工食品的基本方法。 6、测定食品加工中可能产生的有害物质。 7、从生物材料中提取某些特定的成分。 8、植物的组织培养。 9、酶的存在于简单制作方法 10、酶活力测定的一般原理和方法。 11、酶在食品制造和洗涤等方面的应用。 12、制备和应用固定化酶。 13、PCR技术的基本操作和应用。 14、蛋白质的提取和分离 【核心要点突破】 一、微生物的培养与应用 1、培养 （1）培养基的主要种类 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质[来源:学科网][来源:学科网ZXXK][来源:Z。xx。k.Com] 液体培养基[来源:Z+xx+k.Com][来源:学_科_网Z_X_X_K] 不加凝固剂[来源:学,科,网Z,X,X,K] 工业生产 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 （2）消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 （3）微生物的纯化培养 常用方法：平板划线法、稀释涂布平板法 2、微生物的分离与计数 （1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数 ③过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。 （2）分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理 即：科通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→梯度浓度→涂布平板→挑选菌落。 【典例1】（2010?全国卷Ⅰ?T34）下列是与微生物 培养 有关的问题，请回答： ⑴某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，碳源是 ，氮源是 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于 。 ⑵将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是 。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在 期取材；在生产中，常收集培养至 期的细菌用于次生代谢产物的提取。 【解析】⑴固体/半固体培养基常用的凝固剂是琼脂。该培养基上只有能合成脲酶的细菌才能生长，其他细菌受到抑制不能生长。这种培养基是选择培养基。该培养基除凝固剂琼脂外，其他化学成分都是由已知明确的化学物质配成，没有天然物质配成，属于合成培养基。培养基中的碳源是有机碳源，不是无机碳源，判断该细菌不能自己合成有机物，是异养型的。 ⑵将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，就可以得到反映细菌生长规律的曲线，这种曲线叫做生长曲线。培养中的细菌以二分裂进行增殖，细菌数目以等比数列的形式增加，一个细菌繁殖n代，可以产生2的n次方个细菌。因此以菌体数目的对数作为纵坐标便于反 映细菌群体的生长规律。若直接以菌体数目为纵坐标,会因细菌数目大，变化率高，不利于作图。对数期的细菌代谢旺盛，个体的形态和生理特性比较稳定，常作为实验的菌种和科研的材料；稳定期细菌数量达到最高峰，细胞内大量积累代谢产物，特别是次级代谢产物。 【答案】 （1）琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型 （2）生长 培养中的细菌以指数形式增殖，取对数便于反映细菌群体的生长规律（其他合理答案也给分） 对数 稳定 二、传统发酵技术的应用 果酒、果醋、腐乳和泡菜