副溶血性弧菌的检验（10434_18_f_1）.pptVIP

副溶血性弧菌的检验 一、实验目的 理解副溶血性弧菌实验室检验的意义。 掌握副溶血性弧菌的分离培养及生化鉴定方法。 二、实验材料 试剂 氯化钠琼脂平板 、嗜盐性琼脂平板 、三糖铁培养基、盐胨水培养基、各种生化试验管 器具 乳钵 、剪刀、镊子、小铁锉、酒精灯等 三、实验步骤 分离培养 称取样品25g，加225mL3.5％灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个，同时取10mL加入100mL增菌液中，放37℃8~16h培养后，涂上述平板进行分离，37℃培养18~24h取出观察。 挑取可疑菌落，转种3.5％氯化钠三糖铁斜面，37℃、24h观察结果。 三、实验步骤 涂片镜检 将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄（葡萄糖产酸不产气）、上层斜面不变（乳糖、蔗糖不分解）、有动力、不产生硫化氢，进行革兰氏染色镜检形态。 三、实验步骤 嗜盐性试验 将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水（0％，3％，7％，10％）于37℃24h培养后观察生长情况，在无盐和10％盐的胨水中不生长，在3％和7％盐的胨水中生长良好者，继续进行下列有关试验。 三、实验步骤 生化试验 分别接种下列各类生化培养基，葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P，赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验，放37℃培养，除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外，其他均在24h观察结果。 四、结果判定 判定依据： 副溶血性弧菌的生长特性 在无盐的条件下不生长，在含2％~3％氯化钠的培养基中生长最旺盛，氯化钠溶液浓度到达10％以上时不繁殖。 四、结果判定 判定依据： 染色镜检 革兰氏阴性无芽胞杆菌，易呈多形态有动力；多数散在，偶而有成对排列运动活泼；两端浓染，在固体培养条件下能生长周鞭毛。 四、结果判定 判定依据： 主要生化特性 五、实验报告 根据实验结果，判定检验样品中有无如溶血性弧菌的存在，写出实验报告。 * 动物科学与动物医学实验教学中心 * － 硫化氢 ＋ 甘露醇 ＋/－ 溶血性 － 蔗糖 － 精氨酸 － 葡萄糖产气 ＋/－ 鸟氨酸 ＋ 葡萄糖产酸 ＋ 赖氨酸 － 　　　10％ ＋ 靛基质 ＋ 　　7％ ＋ 甲基红 － 耐盐性0％ 结果 项目 结果 项目 * 动物科学与动物医学实验教学中心