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- 2017-06-08 发布于海南
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蛋白質變性試驗
蛋白質變性試驗
原理:
蛋白質變性 denaturation :蛋白質受物理(例:加熱)、化學(例:鹽類、有機溶劑、酸)或酵素(例:凝乳酶)作用時,蛋白質結構發生部份變化,也發生許多性質上的改變。
2.鹽析、鹽溶作用:
鹽溶(salting in):加入濃度低於0.5~1M的中性鹽離子(例:NaCl. NH4 2SO4)時,能增加蛋白質溶解度的現象。
鹽析(salting out):若加入飽和中性鹽溶液時,會使蛋白質從溶液中沉澱析出的現象。
3.有機溶劑的沉澱作用:蛋白質溶液加入大量有機溶劑 例:乙醇丙酮→混勻→觀察
→再加入10 ml水→混勻→觀察
(2)有機溶劑的沉澱作用:
2 ml之sample + 10 ml之95%→混勻→觀察
2 ml之sample + 5滴之1%%→比較2隻試管之沉澱結果
(3)強礦酸的沉澱作用:
2 ml之sample → 徐徐加入0.5 ml之濃硫酸→邊加入邊觀察
→再加入1 ml之濃硫酸→觀察其變化
問題討論:
當蛋白質發生變性時,最常見的影響有哪些? P.38
使蛋白質發生變性之方法有哪些? P.38
補充資料
1.蛋白質結構:
2.Protein Structure:
/watch?v lijQ3a8yUYQfeature related
蛋白質變性:結構發生部份變化,一級結構並未斷裂
4.部份變性蛋白質可在變性條件去除後,回復原態
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