实验二十红辣椒中色素的分离.pptVIP

化学国家级实验教学示范中心 Northwest University 基础化学实验Ⅱ （有机化学实验） 红辣椒中色素的分离 (Separation of Pigments In chilies red) 实验技能训练要点: 巩固训练柱色谱、薄层色谱在天然产物提取中的应用 一、实验目的与要求 二、实验原理 三、装置图 四、实验操作步骤及注意事项 五、实验讨论 六、实验思考问题 内 容 提 要 七、实验延伸 一、实验要求与目的 1、复习色谱法基本原理 2、巩固薄层色谱、柱色谱的规范操作 3、学习并掌握湿法装柱的要点 二、实验原理 1、色谱法的基本原理 2、薄层色谱、柱色谱的含义 3、红辣椒中主要色素的结构式及名称 红辣椒含有多种色泽鲜艳的天然色素，其中呈深红色的色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和少量辣椒玉红素脂肪酸酯所组成，呈黄色的色素则是β-胡罗卜素。它们都属于类胡萝卜素类化合物，从结构上看则都属于四萜类化合物。 本实验是用二氯甲烷为萃取剂，从红辣椒中萃取出色素，经浓缩后用薄层色谱法作初步分析，再用柱色谱法分离第一个色带（什么色？）。 4、主要试剂的物理常数（自查） 二氯甲烷 石油醚 硅胶G 0.5%羧甲基纤维素钠水溶液 色谱柱、薄层板（2块）、 整套回馏装置用仪器、过滤用仪器等 仪器 三、装置图 柱色谱洗脱装置 薄层板展开装置 回馏提取装置等 四、实验操作步骤 （一）操作步骤 1、制板: 洗净并铺薄层板2块(称1.5克硅胶G,加4.5毫升0.5%CMC)，晾干后活化0.5h 2、色素的萃取和浓缩: 将干的红辣椒剪碎研细，称取1.0g，置于25mL圆底烧瓶中，加入10mL二氯甲烷和1粒沸石，水浴加热回流20min。冷至室温后过滤。将滤液浓缩至剩约1mL，即为混合色素的浓缩液。 3、柱色谱分离: 选用内经1cm，长约20cm的层析柱，按照有机化合物的分离和提纯中3.9.2节[1]中的方法，用8.0g硅胶（100~200目）在30毫升石油醚中装柱（湿法装柱）。柱装好后用滴管汲取大部分混合色素的浓缩液，将混合液加入柱中，小心冲洗柱内壁后改用体积为3：8的石油醚（36~60℃）-二氯甲烷混合液淋洗，用接收瓶接收先流出柱子的黄色色带并量取洗脱该色带体积。 4、柱效和色带的薄层检测 取1块已活化好的硅胶薄层板，画好起始线，用平口毛细管点样。每块板上点两个样，一个是混合物的，一个是洗脱出来的色带。用1：3的石油醚-二氯甲烷混合液作展开剂，比较Rf 值，指出色带为何物？观察色带样点展开后是否有新的斑点产生，推估柱层析是否达到预期分离效果。将此板的真实情况画在报告纸上。 （二）数据记录 将展开的薄层板画下来并计算黄色 斑点比移值 （三）注意 1、用过的洗脱液统一回收，不准倒入水池 2、色谱柱中的硅胶要清理干净，统一倒在 垃圾桶中 3、浓缩的混合样留少许做对比用 （四）提问 1.如何制备好的薄层板？ 2.如何使柱色谱分离效果良好？ 五、实验讨论 本实验分离效果如何？ 你有什么改进方法？ 六、实验思考问题 [1] 制备好的薄层板为什么要经过活化后才能 使用？不经过活化就使用，对分离结果有 怎样的影响？ [2] 点样时应该注意哪些问题？点样前在距离 板的一端一厘米处划线的目的是什么？ [3] 色谱柱如何清洗和干燥? 七、实验延伸 与生活相关的实验都能引起学生极大的兴趣。本实验还可让学生探究一些实验参数，如展开剂的配比比例、柱色谱洗脱剂的比例、加热萃取时间等等。 （1）有机化学实验．兰州与复旦合编（第二版） 北京：高等教育出版社，1994． （2）有机化学实验．兰州大学（第三版） 北京：高等教育出版社，2010． （3）胡宏纹 有机化学(第3版)．南京大学 北京：高等教育出版社，2006． （4）魏青 基础实验Ⅱ（有机化学实验） 北京：科学出版社，2011. * 减半量后由于玻璃仪器不配套，损失较大，但能得到产物，量在1.5-2.5克之间即可