实验动物的一般操作技术（一）ppt.pptVIP

张欣洁 公共卫生学院预防医学系 2014年12月05日 实验室注意事项： 1、穿白大褂，戴手套 2、实验室安全 3、班长负责安排分组和值日 4、实验完成收拾台面，保持整洁 5、有问题及时通报 动物： 小鼠 30g左右 （每人2只）♂、♀各半 大鼠 150g左右（每人1只）♂、♀各半 材料: 一次性1ml、5 ml注射器、大小灌胃针头（两人一套） 大小鼠固定器（两人一套） 棉签 棉球 剪刀 血色素吸管 纱手套 一次性胶手套 染液 头皮针（4号半或5号）小鼠笼（每组2个）、搪瓷托盘（每组一个） 试剂： 75%酒精 生理盐水 要求： 四人一组 1.毒理学动物实验的意义 毒理学研究外源化学物对于机体的有害的交互作用，其主要手段是动物实验。通过外源化学物对实验动物的毒性反应，向人（原型）外推，以期评估外源化学物对人的危害及危险性。 3R原则（refinement,reduction,replacement） 2.实验目的 掌握大、小鼠实验的基本操作技术 一、实验的目的和意义 1. 实验动物的选择 2. 实验动物的抓取和固定 3. 性别鉴定 4. 实验动物编号标记 5. 实验动物染毒途径和方法（灌胃、腹腔注射、尾静脉注射） 6. 生物标本的采集 （鼠尾取血、眼眶取血） 7. 实验动物的处死 一、实验内容 实验动物物种选择基本原则： 在受试物代谢、生物化学和毒理学特征方面与人最接近 自然寿命不太长 易于饲养和实验操作 经济并易于获得 * 大鼠 小鼠 豚鼠 兔 健康动物首先看外观： 体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，反应行动灵活。 有无明显疾病症状 体重、年龄 小鼠3周体重约为10~15g，大鼠3~4周体重约为50~70g 选择健康动物，检疫1周后，进行实验 要点： 1、头部固定 2、用力适中 要点： 1、性器官和肛门之间的距离 2、有无睾丸 染色法： 苦味酸（黄色） 品红（红色） 原则： 同一实验中，实验动物的年龄尽可能一致，实验动物体重大致相近； 同组、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%；不同组间同性别动物体重均值差异小于5%；♀♂动物各半，且♀♂实验结果分开统计、分析。 称重 编号 随机分组 经口染毒（喂饲、灌胃、吞咽胶囊等） 经呼吸道染毒（静式、动式和气管内注入） 经皮肤染毒 注射染毒（皮下、皮内、肌内。腹腔和静脉注射等） 其它（直肠内、鼻腔等） * 根据实验目的、实验动物种类，最关键是要参照人接触受试物途径。 经口药品、保健品、食品 采用经口染毒 静脉药品 采用静脉、腹腔染毒 农药、化妆品 经皮染毒 易挥发物质 经呼吸道染毒 要点： 1、用正确的方式抓稳动物，使其不能随意摆动 2、要保持大、小鼠头部后仰，与身体平直 3、贴动物上颌进针，针头到达喉部时轻压头部方向 4、遇到阻力不要用力进针，可以轻轻转动进入 5、灌胃量不超过20ml/kg 6、进针深度：小鼠2.5～4cm，大鼠4～6cm 要点： 1、用正确的方式抓稳动物，使其不能随意摆动 2、从小鼠左下腹部45度角进针，有突破感，回抽无血液或尿液 3、注射药物后使动物头部向下，以便于药物进入腹腔 上 尾动脉 尾静脉 要点： 1、固定好动物 2、用酒精或温水反复擦拭小鼠尾部 3、用手轻弹尾部使血管扩张 4、从尾部远心端进针 5、拔针后立即用棉签压迫止血 血液采集（断尾采血、眼眶采血、动脉采血等） 尿液采集 胆汁采集 粪便采集