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- 2017-03-06 发布于重庆
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海藻DNA提取技术
海藻DNA提取摘要:海藻含有的多糖、多酚、蛋白、核酸酶等物质容易与其DNA结合形成不溶于水的复合物或造成DNA降解,干扰了后续的酶反应,制约了海藻DNA的提取。而目前海藻的分子生物学研究还比较落后,其主要的制约因素是海藻核酸的提取,这同时也是一个世界难题。可以说多糖的去除是海藻核酸分离纯化中最普遍而又最不容易解决的难题。而现今CTAB去除多糖效果非常显著,结合LiCl、PVPP、苯酚抽提、蛋白酶K处理条斑紫菜能获得大于50kb的高纯度DNA,至少可保持1个月以上而无降解,可以直接用于测序、酶切、RFLP、基因组文库构建等工作。而试剂盒法得到的DNA纯度最高,但得率较低却成本较高。LiCl与CTAB法也均能得到高质量的DNA,但是LiCl法相对于CTAB法更加简便有效。并且,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。
关键字:海藻;DNA提取;多糖
大部分的养殖海藻,如紫菜、海带等不但经济价值高、营养价值好,而且还有抗氧化、降血脂等重要作用[1-3 ],现今在中国已成为水产养殖业的一个不可或缺的支柱产品。然而,伴随着如今养殖规模的不断扩大,近年来出现了养殖品种退化和病害问题的严重局面。因此,从基因、基因组水平研究海藻的生长发育规律以及优良性状形成的分子基础,是培育高产、优质、抗逆新品种的最佳途径,而且还可改善甚至解决我国现今海藻养殖的许多问题。并且由于海藻栖息环境的特殊性,故具有许多
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