地中海贫血单基突变遗传病检测的新方法.doc

姓名 身份证号 专业技术职务 所在单位名称 项目中 的分工 签字 项目全面 负责 主要成员(不含申请者) 实验设计，荧光能量转移设计 实验设计， PCR扩增 PCR扩增 －1－ 地中海贫血单基因突变遗传病检测的新方法 二、立论依据 （包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处） 对基础研究，着重结合国际科学发展趋势，论述项目的科学意义； 对应用基础研究，着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题，论述其应用前景。 地中海贫血是一种遗传性血液病，1925年意大利首次报道了此病，目前该病已散布全世界范围。它是一类由于常染色体遗传性缺陷，引起珠蛋白链合成障碍，使一种或几种珠蛋白数量不足或完全缺乏，因而红细胞易被溶解破坏的溶血性贫血。如人体血液中，正常人的红细胞寿命为120天左右，而重型地中海贫血患者的红细胞寿命有些仅为一个多月，红细胞较早遭到破坏，使人体造血机能缺失。病人要维持生命必须进行长期输血。对家庭和社会造成了大的压力。治愈重型地中海贫血的唯一办法就是造血干细胞移植。目前，Efremov, D.G., Dimouxki, A.J. 1991. Mutant oligonucleotide extension amplification: a nonlabeling polymerase-chain-reaction-based assay for the detection of point mutations. Acta Haematol. 85: 66-70. 刘敬忠, 吴冠芸, 姜哲. 1991. 地中海贫血的快速产前基因诊断. 中国医学科学院学报. 13: 372-375. Baysal, E. 1992. Theβamdδ-thalassemia repository. Hemoglobin. 16: 237-245. Chiou, S.S., Liu T.C. 1993. Prenatal and molecular diagnosis ofβthalassemia major in Taiwan by naturally and amplified created restriction sites. Int J Hemat. 59: 1-7. 刘敬忠, 刘辉贤, 王海燕等. 1993. 简便易行的β地中海贫血基因诊断新技术. 中华医学杂志. 73: 432-433. 崔金环, 郑雪莲, 区丽群. 2003. 中重型β地中海贫血基因类型分析. 中国优生与遗传杂志. 11: 32-34. －2－ 三、研究方案 研究目标、研究内容和拟解决的关键问题 该项目是在分子生物医学基础上，将分子探针技术与荧光共振能量转移技术紧密结合，发展一种新的高灵敏高特异的单基因突变遗传病的检测方法。 本项目着重完成以下二个方面的研究：一是探针分子的筛选，二是建立一个适合于检测单碱基突变的高效的荧光共振能量转移体系。 拟解决的关键问题是将核酸分子内的遗传信息准确灵敏地转换为荧光信号。 拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 (1) 研究方法及技术路线 (2) 可行性分析 1．本项目是针对当前现有的生物医学技术范畴内单碱基突变诊断这一世界人们普遍关注的重大问题，根据我们已开展的相关前期工作，确定了清晰的研究思路，并制定了切实可行的技术路线。 2．本项目将依托中南大学生物科学与技术学院完成，该院实验室的硬件和软件基础为本项目的顺利进行提供保障。 .本项目的创新之处 第一：首次将连接技术与荧光共振能量转移技术结合，并用于单碱基突变遗传病的检测； 第二：检测方法比现有方法简便，适用。 －3－ 年度研究计划及预测进展 地中海贫血检测的多条探针的设计 探针的筛选 引物设计，致病基因的扩增 荧光信号的检测，单碱基突变的分析 项目工作的总结和论文的书写。 5. 预期研究成果 (1) 建立一种简便、快速检测单碱基突变引起的地中海贫血疾病的方法； (2) 发表一篇核心期刊以上的文章。 6．结题与考核方式 提交结题报告并发表一篇核心期刊以上的文章。 －4－ 四、研究基础 与本项目有关的研究工作积累和已取得的研究工作成绩 本项目中涉及的一个很重要的问题是分子探针的设计。申请者在这方面有一定的研究积累， 2．本项目组成员所属学科领域及学术研究方向，已具备学术团队的基础 本项目组成成员属于生命科学研究领域，研究小组成