第九章 细胞骨架07580课件.ppt

第九章 细胞骨架 Cytoskeleton 概述 胞质骨架 核骨架 本 章 重 点 细胞骨架的概念 微丝、微管、中间纤维的结构、组成成分、特异性药物与功能 核纤层的作用 一.概述 1928年，Koltzoff提出：原生质中存在着一种具有一定形态和结构的纤维成分，每一细胞就是一个由液体成分和硬性骨架组成的体系。 20世纪40年代，Wyssling提出细胞质中含有细丝组成的网架。 20世纪60年代（1963）Slauterback首先在水螅刺细胞中发现了　微管结构，同时 Porter在植物细胞中也发现了此结构。 后来研究手段和技术不断创新：通过相差显微技术、 电镜技术（免疫标记、冷冻深度蚀刻、无树脂包埋切片技术、高压电镜技术、整装细胞制片技术）相继发现了微管、微丝、中等纤维和微梁网络。 概 念 细胞骨架是指存在于真核细胞中的蛋白纤维网架体系，有狭义和广义两种概念 ，狭义的概念仅指胞质骨架，包括微管、微丝和中间纤维，广义的细胞骨架包括胞质骨架、核骨架、膜骨架及细胞外骨架。 在细胞质基质中包括微丝、微管和中间纤维。 　在细胞核中存在核骨架-核纤层体系。 细胞骨架示意图 一.概述 胞质骨架均由单体蛋白以较弱的非共价键结合在一起，构成纤维型多聚体。 细胞骨架是高度动态的结构体系。在细胞周期的不同时相具有不同的分布状态，在不同分化程度的细胞中组成成分也有差异。 细胞骨架在细胞内起重要的机械支撑、空间定位作用，并参与细胞内物质的运输和细胞的运动，对细胞具有重要作用。 二、细胞质骨架 微丝 microfilament, MF 微 管（microtubules,MT） 中间纤维（intermediate filament,IF 细胞骨架结构与功能总结 １、微丝 microfilament, MF 微丝又称肌动蛋白纤维 actin filament , 是指真核细胞中由肌动蛋白 actin 组成、直径为7nm的骨架纤维。 主要内容有： 成分 装配 微丝结合蛋白 微丝功能 微丝特异性药物 ①、成分（重点） 组成成分：肌动蛋白 actin 肌动蛋白:分子量４３ＫＤ，由单个肽链折叠而成，外观呈碟状（哑铃状）。 ①、成分 组成成分：肌动蛋白 actin 　　肌动蛋白外观呈碟状, 因此又把这种actin称为球形肌动蛋白（G-actin）或单体，对应的将G-actin形成的微丝称为纤维形肌动蛋白（F-actin）。 ①、成分 肌动蛋白在细胞内含量丰富，肌肉细胞中占10%左右，非肌肉细胞中占1%~5%。 目前共发现６种类型的肌动蛋白。a型与细胞收缩有关，β型长位于细胞边缘，γ型与张力纤维有关。 actin在进化上高度保守，酵母和兔子肌肉的肌动蛋白有88%的同源性。 肌动蛋白要经过翻译后修饰，如N-端乙酰化或组氨酸残基的甲基化。 ②、微丝的装配（了解） MF是由G-actin单体装配形成的多聚体，体外研究实验表明，装配与ATP、Na+、K+、Mg2+、温度、其它微丝相关蛋白有关 。 只有结合ATP的肌动蛋白才能组装。 需要Mg2+和较高的Na+、K+浓度。 装配时肌动蛋白单体头尾相接装配。 ②、微丝的装配 装配过程：分为三个阶段，即成核反应 纤维延长 稳定期 成核反应 ：2-3个actin聚集成一个核心（核化），此过程需相关蛋白协助。 纤维延长 ：ATP-actin分子向核心两端加合。 稳定期：微丝的长度保持相对稳定。 微丝的装配示意图 ②、微丝的装配（了解） 装配特点： 微丝的装配具有极性，肌动蛋白分子上的裂口使蛋白结构不对称，装配后单体上的裂口朝向同一端，裂口端为负极，另一端为正极。 ATP-actin加到 + 极的速度要比加到 - 极的速度快5-10倍。这样在体外装配观察中，会表现出一端延长，另一端缩短的现象，称为踏车行为。 去装配时，负极比正极快。 踏车行为示意图 ②、微丝的装配 当溶液中ATP-肌动蛋白的浓度处于临界浓度时（此时微丝组装到一定长度），微丝的组装和去组装达到平衡状态即稳定期。 两条或１条F-肌动蛋白链螺旋盘绕形成微丝（多聚体）。 微丝装配调节相关蛋白 整个骨架系统的结构和功能在很大程度上受到不同的细胞骨架结合蛋白的调节。如 　1．核化蛋白：使游离actin核化，开始组装，Arp 　2．单体隐蔽蛋白：阻止游离actin向纤维添加，thymosin 　3．单体聚合蛋白：将结合的单体安装到纤维，profilin 　4．封端蛋白：使纤维稳定，Cap Z 　５．微丝解聚蛋白：使微丝去组装，cofilin 　６.纤维切断蛋白：将微丝切断，gelsolin ③、微丝结合蛋白 ②、微丝的装配 微丝特异性药物： 　细胞松弛素Ｂ（抑制微丝装配）：可以切断微丝,并结合在微丝正极阻抑肌动蛋白聚合,因而导致微丝解聚。