GeneAnser吉赛尔 RE02-SuperPure多糖多酚植物RNA快速提取试剂盒说明书.doc

Order：座机电话号码 Tech：1座机电话号码50 Tech QQ：座机电话号码6 RNA Kit （Polysaccharides and Polyphenols Rich） SuperPure多糖多酚植物RNA快速提取试剂盒 目录号：试剂盒组成、储存： 目录号 RE0220 组成 储存 20次50次 裂解液LS室温 0 ml 50 ml 去蛋白液PS1 室温 15 ml 40 ml 漂洗液RB 室温 5 ml 10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇 RNase-free H2O 室温 10 ml 10 ml PAE 室温℃ 2 ml 5 ml RNase-free 吸附柱SC和收集管CT 室温 20套 50套 本试剂盒在室温储存个月不影响使用效果。储存事项： 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 产品介绍： 独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PAE帮助结合多糖多酚并通过离心去除然后用乙醇调节结合条件后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。产品特点： 不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 简捷，单个样品操作一般可在分钟内完成。 独有的植物RNA助提剂PAE可以有效结合多糖多酚提高清除效果。多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot实验。注意事项 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的台式离心机 需要自备乙醇，研钵。裂解液LS和去蛋白液PS1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。于DNA 的微量残留 一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留本公司的系列RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留影响不是很大如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR我们建议在进行模板和引物的选择时： 选用跨内含子的引物以穿过mRNA中的连接区这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁 cleanup 请联系我们索取具体操作说明书。 在步骤去蛋白液PS1漂洗前，直接在吸附柱SC上进行DNase I处理。具体操作说明书。 RNA Kit。RE03在RE02 SuperPure Plantpoly RNA Kit基础上，又独家研发成功的基因组DNA清除柱技术可以有效清除DNA残留，在大多数情况下，可以将DNA残留清除到紫外下观测不可见。清除DNA减少竞争吸附硅胶膜的效果，还可能提高产量。同时RE03配有新研发的裂解液LS3，也可以提高产量。可以找我们索取说明书。 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 提示： 第一次使用前请先在漂洗液RB瓶加入指定量无水乙醇! 直接研磨法: a. 新鲜植物组织称重后取100 mg迅速剪成小块放入研钵放入研钵， 加入10体积（1 ml）和1体积（100 μl） PAE 室温下充分研磨，注意应该迅速研磨让组织和裂解液LS立刻充分接触以抑制RNA酶活性。b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15秒，13000 rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PAEc. 取0 μl裂解物上清转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇 0.5体积 ，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程，立即吹打混匀,不要离心。 d. 立刻接操作步骤3。液氮研磨法: a. 取500 μl裂解液LS，转入1.5 ml离心管中，加入50 μl PAE混匀备用。 b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg细粉转入上述装有和PAE的离心管, 立即剧烈。 c. 直到得到满意匀浆结果 或者电动匀浆30秒 可以剪切DNA降低粘稠度和提高产量。 d. 将裂解物离心5-10分钟不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PAE。e. 取裂解物上清转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇 0.5体积 ，此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程立即吹打混匀,不要离心。