HPLC分析在药分析中的应用 论文.docVIP

HPLC分析在中药分析中的应用 摘要：HPLC是一种非常有效并普遍实用的中药分析方法，可用于高分子、极性、离子和热不稳定化合物的分离分析。在中药的定性、定量和杂质检测等方面都发挥了重要的作用，该文综述了高效液相色谱技术在中药材定性、定量分析中的应用。 关键词：高效液相色谱法 沙罗子 金银花 一、Lonicera japonica Thunb）的干燥花蕾或待初开的花。其味甘，性寒，具有清热解毒、疏散风热，疏利咽喉、消暑除烦的作用，可治疗暑热症、泻痢、流感、疮疖肿毒、急慢性扁桃体炎、牙周炎等病。金银花主要含有挥发油、有机酸类、黄酮类、三萜皂苷类、环烯醚萜、苷类和其他无机元素等有效成分。其中，以木犀草素及木犀草苷为代表的黄酮类化合物，具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用而备受关注。本文主要介绍了木犀草素在金银花不同部位中的含量。 1. 材料和方法 1.1　仪器和试剂 HPLC峰面积归一化法测定大于1.8 mg，用甲醇定容至0.1800 mg/mL 的对照品溶液。用0.45 um 的滤膜过滤，备用。 精密称取木犀草苷1.0 mg，用甲醇定容至10 mL 的容量瓶中，配制成浓度为0.1000 mg/mL 的对照品溶液。用0.45 um 的滤膜过滤，备用。 1.2.2 供试品溶液的制备 精密称取干燥恒重的金银花4个部位（花、叶、茎的表皮、茎）的样品各5120 mL 的石油醚，浸泡12ｈ，70℃水浴中提取至溶液显无色，挥发干石油醚，之后加入100 mL甲醇，超声提取3次，过滤、浓缩提取液，定容至5 mL 的容量瓶中，即为测定木犀草素的供试品溶液。用0.45 um 的滤膜过滤，备用。 精密称取上述2. 结果 2.1 木犀草素的含量测定 2.1.1 色谱条件的选择 色谱柱为Aglient Zorbax SB-C18柱（2.1 mm×150 mm，5 umφ＝0.02％）－磷酸溶液（φ＝50％）；流速为0.3 mL/min ；检测波长3500 nm；柱温30℃。在此色谱条件下，木犀草素对照品和金银花1－图5． 2.1.2 线性关系考察 精密吸取浓度为0.1800 mg/mL 木犀草素对照品溶液 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 uL注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积（Y ）为纵坐标，木犀草素对照品的含量（X）为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为Y=-6.2442+5618.6X ，r=0.99960.0720～0.288 g5次，每次1 uL，测定木犀草素峰面积积分值的RSD为0.92％（n＝5）。 0，1，2，4，8，12，16，24 h进样1 uL，测定峰面积，结果RSD为1.2％（n＝8）。 5.0000 g 金银花样品4份，按 1.23 uL，测定峰面积，结果计算金银花中木犀草素含量的RSD为0.38％。 1.0 mL，各平行0.5 mL，分别进样，进行含量测定，计算3个部位的平均加标回收率分别为97.8％，98.6％，95.4％，RSD 为0.91％，1.3％，1.1％。 1.2 样品制备方法得到2.1.1 的色谱条件，对3个部位中木犀草素含量进行测定，每次进样3 uL，测得金银花 3.结论 本实验采用高效液相色谱法对河南封丘县金银花4个部位（花、叶、茎的表皮、茎）中的木犀草素进行含量测定，方法操作简便、结果准确、专属性强。测定结果显示：该地区的金银花植物中，木犀草素存在于金银花的花、叶和茎的表皮中，而茎中没有检测到木犀草素。 金银花中的木犀草素含量：叶＞茎的表皮＞花，但含量都较少。 二、鉴别大黄及含部分大黄中成药的真伪 国家药典规定，正品大黄来源于蓼科，属于掌叶组植物的干燥根及根茎。以个头大，色黄而得名。伪品大黄主要来源波叶组的波叶大黄，包括河套大黄、华北大黄、藏边大黄等。波叶组的伪品大黄产量大，流散广，市场中较为常见，但其并非药典收藏的正品大黄，因此均属伪品。正品大黄具有攻积滞、清湿热、泻火、凉血、祛瘀、解毒等功效，是临床较为常用的一种药品。而伪品大黄则不具备这样的功效。目前由于正品大黄产量有限，市面上涌现出大量伪品大黄以假乱真、以次充好，严重干扰医疗市场，甚至威胁患者的生命健康，因此，鉴别大黄真伪至关重要。正品大黄无论从宏观还是微观，甚至理化性质检测结果均与伪品大黄有着很大区别，鉴定的方法也多种多样。本文采用高效液相色谱法（HPLC法）对大黄真伪进行鉴别，并选取清肺抑火片为含大黄中成药物的代表，鉴定其所含大黄真伪。 1.1 仪器与试药 仪器：日本岛津（LC-2010A）高效液相色谱仪；TG332A型微量分析天平(上海分析天平厂)。 试药与试剂：土大黄