选修3(人教版).2基因工程操作的基本步骤.docVIP

专题1 1.2 基因工程的基本操作程序 课前预习案 预习目标 1.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤？ 2.目的基因主要是指什么，也可以是什么？目前常用的获取目的基因的方法有哪三种？ 3.什么是基因文库？有哪几种？如何区分？ 4.从基因文库中获取目的基因的依据有哪些？（找出5条） 5.利用PCR技术扩增目的基因： （1）PCR的含义：一项在生物体外_____特定DNA片段的核酸合成技术。其原理是 。 （2）前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。 （3）过程：目的基因DNA受热变性后解链为 ， 与 相应互补序列结合，然后在 作用下进行延伸，形成DNA。 （4）方式：成______形式扩增（约为_____，其中n为扩增循环的次数）。 6.人工合成法：当基因较 ，核苷酸序列 时，可以通过DNA合成仪用化学方法直接 合成。7.基因工程的核心是什么？目的是什么？ 8.一个基因表达载体由什么组成？各有什么功能（作用）？ 9.什么是转化？ 10.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是什么?除此之外，还有什么方法？ 11.转基因动物中采用最多，最为有效的将目的基因导入动物细胞的方法是什么？ 12.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用__ _处理细胞，使细胞处于一种____________ _____ 的生理状态，这种细胞称为__________。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与 细胞混合，在一定的温度下促进 细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 13.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是什么？检测方法是什么？ 14.检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是什么？检测方法是什么？ 15.检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是什么？除了上述分子检测外，有时还需要进行什么水平的鉴定？ 三、预习自测 1.下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（ ） ①目的基因的检测与表达 ②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的提取 A、①②③④ B、④③②① C、④②③① D、③④②① 学习目标学习重点： 学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。 学习过程PCR技术与DNA复制有何异同 DNA复制 PCR技术 不同点 场所 酶 引物 温度 相同点 2.如何区分不同的基因文库？（见课本第10页表格） （二）基因表达载体的构建 1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？ 2.基因表达载体的构建需要哪些工具酶？ 3.将目的基因与混合并用DNA连接酶处理后，会出现几种结果根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入子叶植物，你应该如何做？比较将目的基因导入受体细胞方法? 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 受体细胞 转化过程 （四）目的基因的检测与鉴定 1.为什么要有“目的基因检测与鉴定”这一步？ 2.分子检测过程中，有哪几种杂交带？各说明什么问题？ 反思总结 基因工程的基本操作步骤 主要方法、技术或组成 步骤一： 步骤二： 步骤三： 导入植物细胞： 导入动物细胞： 导入微生物细胞： 步骤四： ） A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B.细菌质粒是基因工程常用的运载体 C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D.为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为载体 2.PCR技术扩增DNA，需要的条件是（　　）? ①目的基因　 ②四种脱氧核苷酸　 ③DNA聚合酶等 　④mRNA 　⑤核糖体? A．①②③ B．②③④C．①②③ D．①②⑤ 3.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在其基本操作步骤中，不进行碱基互补配对步骤是 A．人工合成基因B．目的基因与运载体结合C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测和表达（ ） （1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？为什么？ 。 （2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。 （3）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 个。 （4）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和BC。 （5）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。 6 上述过程中涉及的现代生物技术有 。 7 在利用大肠杆菌生产人胰岛素过程中，目的基因是 ，所用载体是 。表达载体的结构组成包括____________、____________、____________、____________。 8 目的基因在大肠杆