5植物细胞培养与次级代谢产物制备分析.pptVIP

Chapter 5 细胞工程 ?固定化后需要测定细胞存活率大小，方法有： （1）荧光染色观察法：根据活细胞对FDA（二乙酸荧光素）黄绿色荧光染料能被吸收，而死细胞无法吸收原理鉴定。 （2）呼吸强度测定： 用氧电极法测定固定化细胞的呼吸强度判断存活率。 （3）细胞分解和生长速率的测定： 通过测定细胞的湿重或干重增加率反映细胞活性大小。 2.5.2 固定化细胞活力测定 Chapter 5 细胞工程 常用的反应系统有2种： ?流化床生物反应器 Fluid-bed bioreactor ：通过通入液体或气体使固定化细胞悬浮于反应器中； 优点：细胞包埋颗粒小，传质效率高；缺点：剪切力或碰撞会破坏固定化细胞。 2.5.3 植物细胞固定化生物反应器 ? 细胞固定在支持物（如筛网）的内部或表面，细胞固定不动，培养物流体按一定方向（从下向上）从反应器中流过实现混合和传质。 优点：单位体积细胞的容量大。 缺点：①混合效率低、细胞颗粒大，易造成传质困难；②固定床颗粒或支持物碎片会阻塞液体的流动；③固定材料易变形，阻塞筛网。 细胞固定化生物反应器 ? 填充床生物反应器 Pipe-cone bio-filter reactor ? 两相培养技术：指在细胞培养体系中加入有机溶剂（如豆油、石蜡油）或吸附性的多聚化合物，而细胞在水相生长，合成的次级代谢产物立即转移到有机相，减少了对产物的反