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Chapter 8RNA processing 一、RNA的加工： 将各种前体RNA分子加工成成熟的、有活性的RNA的过程 二、场所： 主要是在细胞核内进行 三、RNA加工的类型： 1、剪切：就是剪去部分序列； 2、剪接：是指剪切后又将某些片段连接起来。 3、末端添加核苷酸：如 tRNA的3′-末端添加-CCA。 4、修饰：在碱基及核糖分子进行化学修饰。 5、RNA编辑：某些RNA，特别是mRNA自DNA模板上所获得的遗传信息，在转录后又发生了变化。 一、原核生物rRNA的加工 1、核糖核蛋白复合体（RNP） 形成 初生转录物形成一些茎环结构，随后与一些蛋白结合形成核糖核蛋白复合体（RNP） 2、甲基化修饰：（通常是A） 甲基供体-- S-腺苷甲硫氨酸 3、剪切： （1）RnaseⅢ剪切释放出5S，16S，23S前体分子； （2）随后RNA酶M5, M16, M23分别在每一前体分子的5’端和3’端进行剪切。 二、真核细胞rRNA的加工 （一）概述 1、rRNA基因： RNA聚合酶Ⅰ转录—转录物需要加工 2、5s rRNA 基因： RNA聚合酶Ⅲ转录--转录物一般不需加工 （1）广泛地进行甲基化修饰，主要是在28S及18S中。 （2）除掉外部转录间隔区(ETS)1和2，再切去内部转录间隔区（ITS），释放出32S和20S的两个前RNA。 （3）随后45 S rRNA前体经核酸酶顺序剪切下生成18S、5.8S、28S rRNA。 第三节 tRNA的加工 一、原核生物tRNA的加工 1、tRNA的编码序列 大肠杆菌rRNA 操纵子中含有tRNA的编码序列 tRNA 的操纵子：含7个tRNA 基因 2、原核生物tRNA的加工过程 初始转录物 RNase D, E, F and P 具有成熟末端的tRNA Base modification 成熟tRNA 内切核酸酶（Rnase E、F）在3‘ 端切除一个侧翼序列，在前体的3’ 端留下一个额外的九核苷酸 外切酶RNaseD 依次切去3 ’端的7个核苷酸 内切酶RNaseP切除5 ’端的一段，产生成熟的5’ 端 外切酶RNaseD继续除去3 ’端剩余的两个核苷酸直至CCA，产生成熟的3’ 端 二、真核生物tRNA的加工 1、tRNA 前体 5’端有 16 nt 的前导序列 14 nt 内含子 3’端有 2个额外的核苷酸 2、真核生物tRNA的加工的过程 去除5’ 前导序列和 3’ 额外的核苷酸 3’ 端添加CCA，产生成熟3’ 端 内含子的剪接 碱基修饰 CCA 的添加 tRNA核苷酸转移酶（tRNA nucleotidyl transferase） 三、真核tRNA的加工和原核的区别 1、真核tRNA前体中无二聚体和多聚体； 2、增加了剪接内含子的过程； 3、真核生物CCA多由tRNA核苷酸转移酶添加，而原核多由tRNA基因编码。 第四节 前体mRNA的加工 二、核内不均一RNA（hnRNA）--RNApolⅡ的产物 hnRNP： hnRNA+蛋白 前mRNA snRNP：snRNA+蛋白 功能：参与前mRNA的剪接 三、真核生物前mRNA加工过程 前mRNA加工过程 5’端加帽（5’-capping） 3’端加尾 剪接（splicing） 甲基化修饰（methylation） 1、三种5’帽结构形式 帽0 m7GpppNpN 帽1 m7GpppNmpN 帽2 m7GpppNmpNm 2、5’帽的作用： （1）防止被5’外切核酸酶降解 （2）翻译时可被起始因子和核糖体识别 （3）有助于mRNA越过核膜，进入胞质 （4）提高mRNA的剪接效率 3、5-capping: m7G ( 5’-5’, mRNA guanyltransferase鸟苷转移酶) Base 1: 2’-OH 甲基化；A (N6-甲基化) Base 2: 2’-OH 甲基化 （1）mRNA5′末端pppNp在磷酸酶作用下脱Pi，形成ppNp-。 （2）在鸟苷酸转移酶作用下，与Gppp反应形成GpppNp-, 连接方式为5’-5’三磷酸桥。 （3）在甲基转移酶作用下，由腺苷蛋氨酸(SAM)提供甲基，在鸟嘌呤的N-7上甲