反相高效液相色谱法检测大鼠血浆吡非尼酮浓度.docVIP

反相高效液相色谱法检测大鼠血浆吡非尼酮浓度 摘要：目的 ：建立高效液相色谱法检测大鼠血浆吡非尼酮浓度的方法。 方法 ：以ZORBAX XDB-C18色谱柱（150mm×4.6mm，5μm）分离；以乙腈-0.2%三氟乙酸-水为流动相，梯度洗脱，流速为1.0mL?min-1；检测波长314nm，柱温为30℃。以卡马西平为内标，大鼠血浆经乙酸乙酯萃取后检测。 结果 ：吡非尼酮浓度在0.05～6.00mg?L-1范围内线性关系良好（r 0.9998）；低中高三个浓度（0.1、1.00、4.00mg?L-1）的日内精密度RSD分别为4.95%、2.86%和2.15%，日间精密度RSD分别为5.39%、4.04%和2.62%；相对回收率分别为（102.33±5.47）%、（101.38±3.69）%和（101.84±3.24）%。 结论 ：该方法稳定准确、简便快速，适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。 关键词 ：吡非尼酮 高效液相色谱法 血浆浓度 Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.042 Determination of pirfenidone in Rat Plasma by RP-HPLC Wang Lingfei Song Jijun Gu Jianping Abstract：Objective：To develop a HPLC method for determination of pirfenidone in rat plasma. Methods：The analytical column was packed with ZORBAX XDB-C18. The mobile phase was acetonitrile-water-0.2% trifluoroacetic acid using gradient elution and the flow rate was 1.0 mL?min-1. The detection wavelength was set at 314 nm. Excellent liner relationship was obtained from the range of 0.05 mg?L-1 to 6.00 mg?L-1（r 0.9998）. The intra-day RSD were 4.95%、2.86%and 2.15% and inter-day RSD were 5.39%、4.04% and 2.62% respectively at three concentrations（0.1、1.00、4.00 mg?L-1）， the relative recoveries were （102.33±5.47）%， （101.38±3.69）% and（101.84±3.24）% respectively. Result： Conclusion：The method is steady， accurate， simple， rapid and suitable for determination of pirfenidone concentration in rat plasma and study of its pharmacokinetics. Keywords：Pirfenidone HPLC Plasma concentration 【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2013）07-0045-02 试剂与药品。甲醇、乙腈为色谱纯（天津科密欧化学试剂有限公司），三氟乙酸（Sigma-Aidrich，BCBC2263V），乙酸乙酯、碳酸钠为分析纯。吡非尼酮对照品（Sigma，座机电话号码）；卡马西平对照品（中国食品药品检定院，批号：041201）。 1.2 仪器。高效液相色谱仪为Agilent 1100系列产品，配置有G1322A在线脱气机、G1311A四元泵、G1313A自动进样器、G1316A温控箱、G1315B二极管阵列检测器；其他仪器有涡旋混合器和氮吹仪。 1.3 标准品溶液配制。准确称取吡非尼酮标准品10mg，用甲醇溶解并定容至10ml，得吡非尼酮标准储备液的浓度为1g?L-1；吡非尼酮标准工作液浓度依次为100、10、1mg?L-1（用纯净水稀释）。 准确称取替硝唑标准品25mg，用甲醇溶解并定容至25mL，得替硝唑标准储备液浓度为1g?L-1；替硝唑内标工作溶液浓度为100mg?L-1（用甲醇稀释）。 1.4 色谱条件。色谱柱：ZORBAX XDB-C18（4.6×150mm，5.0μm）；保护柱：XDB-C18保护柱（4.6×12.5mm，5μm）；流动相为乙腈-水-0.2