肝龙胶囊对大鼠慢性酒精性肝损伤的防治作用研究.docVIP

肝龙胶囊对大鼠慢性酒精性肝损伤的防治作用研究 　　[摘要] 目的：研究肝龙胶囊对大鼠慢性酒精性肝损伤的防治作用及作用机制。方法：采用梯度浓度乙醇灌胃12周建立慢性酒精性肝损伤模型。检测大鼠血清中ALT，AST，TG，CHO，TNF-α水平和肝组织中GSH，SOD，MDA，ADH和Alb的水平，以及肝脏病理学检查，并对其损伤程度进行病理分级。结果：肝龙胶囊能降低肝损伤大鼠血清中ALT，AST，CHO，TG，TNF-α和肝组织中MDA的含量（ P0.01），提高肝组织中抗氧化剂GSH和SOD的活性（ P0.01）；病理切片观察可见，模型组大鼠肝小叶结构大部分被破坏，肝细胞索紊乱，胞浆内出现弥漫性大小不等的脂肪空泡，可见灶状坏死和炎性细胞浸润；各治疗组大鼠肝损伤均有不同程度的减轻。结论：肝龙胶囊对大鼠慢性酒精性肝损伤有显著的防治作用。 　　[关键词] 美洲大蠊；酒精性肝损伤；脂质过氧化；氧自由基；防治作用 　　近年来，酒精滥用和酒精依赖引起的疾病已成为当今世界日益严重的公共卫生问题[1]。在非病毒性肝病中，酒精性肝病（ALD）发病率占据首位[2]。随着全球酒精消费量的快速上升，酒精性脂肪肝（AFL）已是西方国家导致肝硬化的最主要病因，也是十大常见致死病因之一。在我国，ALD的发病率也呈逐年上升的趋势，酒精已成为我国继病毒性肝炎后导致肝损害的第二大病因[3]。肝龙胶囊是大理学院李树楠教授利用现代提取、分离技术从美洲大蠊（俗称蟑螂）中提取的一组有效物质，主要成分是粘氨糖，是治疗慢性乙型肝炎的国家二类新药（中药），对乙型肝炎有较好的治疗效果，而且毒副作用较小。但是，在治疗ALD方面未见研究报道。因此，本课题就肝龙胶囊对慢性酒精性肝损伤的防治作用进行了研究，进一步挖掘肝龙胶囊的药用价值，为ALD的防治提供一定的研究基础。 　　1 材料 　　1.1 动物 健康 SD 大鼠，60 只，雌雄各半，体重（200 ± 20） g，由昆明医学院动物实验中心提供，合格证号SCXK（滇）2005-0008。 　　1.2 试剂 肝龙胶囊（昆明赛诺制药有限公司，批；硫普罗宁（河南省新谊药业股份有限公司，批号100403）；56%红星二锅头白酒（北京红星股份有限公司，批；谷丙转氨酶（ALT）测试盒（批、谷草转氨酶（AST）测试盒（批、甘油三酯（TG）测试盒（批、胆固醇（CHO）测试盒（批、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（批、丙二醛（MDA）测试盒（批、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒（批、还原型谷胱甘肽（GSH） 测试盒（批、乙醇脱氢酶（ADH）测试盒（批、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）测试盒（批、白蛋白（Alb）测试盒（批号201111024），以上试剂盒均为南京建成生物工程研究所生产。 　　1.3 仪器 1.0型高速低温离心机（德国Heraeus），XW-80 A型漩涡混合器（上海精科实业有限公司）；MERRLERAE240型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；JH-C-06-04型紫外分光光度计（上海青华科技仪器有限公司）；H.S21-4型数显恒温水浴锅（北京长安科学仪器厂）。 　　2 方法 　　2.1 造模与给药 将85只大鼠适应性喂养1周后，除正常组外，先用40%的白酒灌胃1周，以后每周将白酒的浓度提高5%进行灌胃，第4周后开始灌胃56%的白酒，前4周灌酒的剂量为10 mL·kg-1，4周后灌酒剂量为12 mL·kg-1，每天1次，共造模12周。造模至第8周末时，将大鼠随机分正常组、模型组、硫普罗宁组（120 mg·kg-1）、肝龙胶囊低、中、高剂量组（30，60，120 mg·kg-1）；每天给药1次，共给药治疗4周。 　　2.2 样本采集与指标检测 最后1 d灌胃给酒后，禁食不禁水12 h，各组动物称重，眼球取血，静置1 h后，分离血清，用于检测ALT，AST，TG，CHO，TNF-α水平。取肝脏左叶浸泡于10%福尔马林中固定24 h，进行 HE 染色，光镜下观察肝组织病理改变。剩余肝脏分别制备成10%肝脏匀浆用于检测MDA，GSH，ADH含量，及1%肝脏匀浆用于检测SOD和Alb水平。 　　2.3 统计学处理 采用SPSS 17.0 统计软件对数据进行处理，计量资料结果均以±s表示，多组间均数比较首先采用方差齐性检验后用单因素方差分析（One-Way ANVOA）进行统计学分析；等级资料用秩和检验，P0.05 表示差异有统计学意义。 　　3 结果 　　3.1 各实验组动物一般状态观察