响应面法设计降鸡蛋胆固醇中草药复方添加剂的研究.docVIP

响应面法设计降低鸡蛋胆固醇的中草药复方添加剂的研究 门文卉，陈晗，林连兵，邓先余* （昆明理工大学，生命科学与技术学院，云南省昆明市 邮编650500）and nutrient level of hen’s daily diet 原料组成 含量% 营养水平 含量% 玉米粉 61 代谢能MJ/KG 11.42 豆粕 22 粗蛋白 18.17 麸皮 2 钙 3.73 鱼粉 4.5 总磷 0.64 石粉 9 蛋氨酸 0.31 食盐 0.2 胱氨酸 0.27 硫化钙 3 赖氨酸 0.97 预混料 0.3 注： 每千克添加维生素A 9000IU，维生素D 2500IU，维生素E 20IU，维生素12 12μg，维生素K 2.4mg。 2.每千克饲料添加微量元素Mn 100mg，Zn 60mg，Fe 25mg，Cu 5mg，Co 0.1mg。 1.4 实验设计 采用响应面分析法（Response Surface Methodology，RSM）寻求最优参数。在前期实验的基础上，选取泽泻超微粉碎物用量（100~1000mg）、决明子超微粉碎物用量（150~1500mg）、绞股蓝超微粉碎物用量（60~600mg）三个因素为自变量，以鸡蛋蛋黄中的胆固醇含量作为响应值，表观中草药复方添加剂降低鸡蛋胆固醇的效果。根据响应面法中的Box-Behnken实验设计原理，运用Design Expert 8.0设计3因素、3水平的响应面实验（实验因素与水平见表2，实验设计见表3，每边中心点为5，共17组实验）。 表2 响应面试验因素、水平表 Table2 Factors and leve1s of response surface 因素 编码 编码水平 -1 0 1 泽泻超微粉碎物用量 A 100 550 1000 决明子超微粉碎物用量 B 150 825 1500 绞股蓝超微粉碎物用量 C 60 330 600 表3 响应面设计及试验结果 Table3 Experimental design and results of response surface 编号 因素水平 蛋黄胆固醇含量(mmol/L) 泽泻超微粉碎物用量（mg） 决明子超微粉碎物用量（mg） 绞股蓝超微粉碎物用量（mg） 实测值 预测值 1 -1 -1 0 5.02 4.95 2 1 -1 0 3.92 3.86 3 -1 1 0 4.30 4.36 4 1 1 0 3.58 3.65 5 -1 0 -1 5.18 5.17 6 1 0 -1 4.32 4.31 7 -1 0 1 4.92 4.94 8 1 0 1 3.99 4.00 9 0 -1 -1 4.96 5.04 10 0 1 -1 4.35 4.30 11 0 -1 1 4.37 4.42 12 0 1 1 4.44 4.36 13 0 0 0 2.75 2.52 14 0 0 0 2.53 2.52 15 0 0 0 2.34 2.52 16 0 0 0 2.47 2.52 17 0 0 0 2.53 2.52 1.5 验证实验 在1.2的255羽鸡外另选取30羽鸡，随机分为实验组和空白组两组，每组15羽。实验组日粮中（除基础日粮外还要）添加按照最优配方比配制的降胆固醇中草药复方添加剂，空白对照则只饲喂基础日粮，饲喂方法和管理均同1.3。预饲期2周结束后，进行4周正式试验，收集第28天的鸡蛋，进行蛋黄胆固醇含量测定。把实验组的实验值和预测值相对比，进行模型验证。 1.6 中草药复方添加剂效果评估与(评估)方法 1.6.1 生产性能指标 实验期间每日以组为单位记录产蛋数和蛋重，每七天末称重一周余料量，统计日均产蛋率、日均采食量和料蛋比等指标。 日均产蛋率%=总蛋数/（天数*鸡的数量）*100% 日均采食量（g）=（每周饲喂量-每周余料量）/（天数*鸡的数量） 料蛋比=总采食量（g）/总蛋重（g） 1.6.2 蛋的品质检测 实验第28天，随机抽取两组鸡蛋各5枚，测定抽样鸡蛋的蛋品质指标。用分析天平测定蛋重、蛋黄重、蛋壳重，用游标卡尺测定蛋形指数、哈氏单位、蛋壳厚度，用罗氏比色扇测定蛋黄颜色。 1.6.3 蛋黄胆固醇含量、甘油三酯含量的检测 实验第28天，随机抽取两组鸡蛋各5枚，分离蛋黄后搅匀。称取1.00g蛋黄液，0.9%生理盐水溶解，20ml容量瓶定容待测。利用试剂盒，采用胆固醇氧化酶法测定总胆固醇含量；采用酶法测定甘油三酯含量、高密度脂蛋白胆固醇含量和低密度脂蛋白胆固醇含量。 1.6.4 血清生化指标检测 实验结束后禁水禁食24小时，每组抽样5羽鸡，进行翅静脉采血3~5mL，4℃静置12小时，离心10