细胞分子生物学总结--量多,慎入.docVIP

衰老的细胞结构学基础，如何调控 细胞的衰老的相关实验：Senescence is an autonomous property of normal cells，Hayflick and Moorhead, 1965，是通过用40次分裂的male细胞和10次分裂的female细胞来比较，30次后只有female细胞存在。 衰老细胞特征：大多变大，运动性降低，饱和密度减少；衰老细胞不同于在G0期的静止细胞，因为衰老是不可逆的；衰老细胞抵抗凋亡，这就解释了为什么衰老细胞没有被清除而是积累老化。 衰老细胞的标志：senescence markers：SA-Bgal and DDR signaling 1，本质上不可逆的生长停滞； 2，细胞增大； 3，表达衰老相关的半乳糖苷酶; 4，通过活化pRB，表达p16INK4a，导致形成衰老相关的异染色质聚点（SAHF）：K9M-H3, HP1, and Rb 5，衰老细胞通过持久的DDR信号来分泌生长因子，蛋白酶，CK和其他因子。 6，细胞开始衰老，用持久的DDR信号来庇护DNA片段，用染色体修改来增强衰老聚点，包括已活化的DDR蛋白。 细胞衰老的特征： 研究表明，衰老细胞的细胞核、细胞质和细胞膜等均有明显的变化： 　　 ①细胞内水分减少，体积变小，新陈代谢速度减慢；②细胞内酶的活性降低；③细胞内的色素会积累；④细胞内呼吸速度减慢，细胞核体积增大，核膜内折，染色质收缩，颜色加深。线粒体数量减少，体积增大； ⑤细胞膜通透性功能改变，使物质运输功能降低。 衰老细胞的形态变化表现有：1、核：增大、染色深、核内有包含物2、染色质：凝聚、固缩、碎裂、溶解3、质膜：粘度增加、流动性降低4、细胞质：色素积聚、空泡形成5、线粒体：数目减少、体积增大6、高尔基体：碎裂7、尼氏体：消失8、包含物：糖原减少、脂肪积聚9、核膜：内陷 自由基是一类瞬时形成的含不成对电子的原子或功能基团，普遍存在于生物系统。其种类多、数量大，是活性极高的过渡态中间产物正常细胞内存在清除自由基的防御系统，包括酶系统和非酶系统。前者如：超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)，非酶系统有维生素E，醌类物质等电子受体。 自由基的化学性质活泼，可攻击生物体内的DNA、蛋白质和脂类等大分子物质，造成损伤，如DNA的断裂、交联、碱基羟基化。蛋白质的变性而失活，膜脂中不饱和脂肪酸的氧化而流动性降低。超氧化物岐化酶与抗氧化酶的活性升高能延缓机体的衰老。 细胞复制的失败可能是由于端粒受损 IPS与ES比较： ES是胚胎干细胞iPS是诱导多能干细胞 1来源不同 一个是来自胚胎，一个是来自已经分化的体细胞。 2获得个工艺不一样，ES直接从胚胎提取，ips是通过体细胞导入一些基因诱导产生。 3能力不同，ES比ips的能力要强，ips对于部分细胞分化有局限性，ES有更好的全能性。 4ES使用中有伦理观念的限制，而ips不存在这个问题，他可以用自身的体细胞诱导产生。跳过伦理观念的限制。 分离体细胞，体外培养5-6代；通过转基因导入重编程基因；在筛选培养基中筛选培养10-30天；挑取克隆，扩增形成iPS细胞系；iPS细胞鉴定(表面标志物、分化全能性)等。 周琪等制备了37株iPS细胞，利用其中6株iPS细胞系注射了1500多个四倍体胚胎，最终3株iPS细胞系获得了共计27个活体小鼠，经多种分子生物学技术鉴定，证实该小鼠确实从iPS细胞发育而成，有些小鼠现已发育成熟并繁殖了后代。这是世界上第一次获得完全由iPS细胞制备的活体小鼠，有力地证明了iPS细胞具有真正的全能性。细胞中发生了突变或过度表达并可引起细胞癌变的原癌基因。活化后能引起正常细胞转变为癌细胞的基因。原癌基因proto-oncogene是细胞内与细胞增殖相关的基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 是指能够抑制细胞癌基因活性的一类基因，其功能是抑制细胞周期，阻止细胞数目增多以及促使细胞死亡。通常是一对等位基因均告缺失或都因突变而失去活性时，细胞发生癌变，此时缺失或突变的基因一般就是抑癌基因。可阻断细胞进入S期，细胞增殖负调控因子可抑制c-myc表达及功能 P53的一个等位基因突变，其产物可抑制另一个野生型产物的作用，通过蛋白-蛋白作用而失活P53突变协助ras基因致癌，P53成为癌基因，这称为显性致癌（dominant oncogenic） 5、正常情况下p53以低水平存在，半衰期短。DNA损伤稳定p53并增加其转录活性 Rb基因产物及功能：编码P105-Rb的核蛋白，可与DNA结合，属反式调控因子，其活性受磷酸化（有活性）/去磷酸化调节，能提供细胞增