植物细胞工程的基本技术正式2121资料.ppt

1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆动物-----克隆羊多利诞生于英国, 标志着一种新的生物技术---动物体细胞克隆技术面世, 也揭开细胞工程更深层次发展的序幕! 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程？ 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念： 按操作对象分 植物细胞工程 动物细胞工程 前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术, 后者是分子水平上的生物技术。 克隆多莉羊技术是 水平上的技术， 培育抗虫棉是 水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比： 细胞 分子 思考: 2.1 植物细胞工程 植物细胞工程技术常用的技术手段： 植物组织培养和植物体细胞杂交 植物组织培养技术 科学家利用菊花花瓣培养的菊花 为什么菊花的一片花瓣就可以培育出完整的植株呢? 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因. ＞ 3、大小： 一、细胞全能性 A、植物细胞 动物细胞; B、受精卵 胚胎干细胞 生殖细胞 体细胞; C、分化程度低的细胞 分化程度高的细胞 ＞ ＞ ＞ ＞ 4、生物体内细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织器官的原因 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 5、植物细胞表现出全能性的条件： ?离体 ?一定的营养物质、激素 ?适宜的温度、pH、无菌等外界条件 科学研究表明，当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织处于游离状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整植物。 实验：胡萝卜的组织培养 二、植物组织培养技术 (1)次氯酸钠、无菌水、高压灭菌锅、超净工作台、消毒用棉球都意味组织培养过程全程灭菌，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？ 避免杂菌与培养物争夺营养，且杂菌会产生对培养物有害的物质。 （2）为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培养成小植株吗？ 因为这部分容易诱导形成愈伤组织；胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 （3）植物组织培养技术的流程图。 外植体 （消毒） 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田,培养成正常植株 脱分化 再分化 胚状体或丛芽 （4）应该掌握的几个概念： ①愈伤组织： 离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过脱分化和细胞分裂，形成一种a、高度液泡化；b、无定形状态薄壁细胞组成的；c、排列疏松无规则的组织。 ②脱分化： ③再分化： 就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，又称去分化。 脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 （6）决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例 （5）脱分化的实质和结果是什么 ？ 脱分化的实质是恢复细胞全能性的过程，结果是形成愈伤组织。 生长素 大于1----促进根形成 小于1-----促进芽的形成 等于1-----愈伤组织不分化 细胞分裂素 5、植物细胞表现出全能性的条件： ?离体（前提） ?一定的营养物质（蔗糖、矿质元素、维生素等）、植物激素（细胞分裂素、生长素）。 ?适宜的温度、pH、无菌、光照的控制等外界条件 6、诱导愈伤组织的过程中对光有什么要求？为什么？ 一般避光培养； 在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。（但再分化时需要光，光能使细胞内形成叶绿体、叶绿素，进行光合作用） 7、植物组织培养不同阶段的代谢类型？ 愈伤组织之前是异养需氧型（蔗糖供能），愈伤组织之后是自养需氧型。 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 A、脱分化 B、再分化 （离体的,已分化组织或细胞） （未分化） （分化） 1、植物组织培养的过程 二、植物组织培养技术 1、脱分化过程进行有丝分裂 2、再分化过程进行有丝分裂，也进行细胞分化 2、植物组织培养的概念： 植物组织培养就是在 条件下，将 ， 培养在 上， 给予