月季p花药培养TY1分解.pptVIP

JLSSY BYH zxxkw 知识回顾 单倍体育种的过程？ 花药离体培养（N） 单倍体植株（N） 秋水仙素处理，使染色体翻倍 植株（2N） 特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。 正常植株（2N） 被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分。 雌蕊 雄蕊 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 雄蕊 一、被子植物的花粉发育 zxxkw 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 4个小孢子 小孢子四分体时期） 减数分裂 小孢子四分体 1个小 孢子 花粉粒 （双核期） 有丝分裂 单核 双核 营养细胞核 营养细胞 生殖细胞核 2个精子 花粉是单倍体的生殖细胞 有丝分裂 花粉粒 zxxkw 小孢子母细胞 （ ）时期 单核（ ）期 双核期 （ ）细胞核 （ ）细胞核 （ ）细胞 （ ）细胞 （ ）个精子 （ ）分裂 （ ）分裂 单核（ ）期 （ ）分裂 减数 小孢子四分体 中 边 有丝 生殖 生殖 花粉管 营养 有丝 2 2N N N N N N N N N 思考： （1）假如一种生物体细胞有20条染色体，则小孢子母细胞、小孢子、营养细胞、精子中各有多少条染色体？ 小孢子母细胞：20 小孢子：10 营养细胞：10 精子：10 注意： ①“此”四分体非“彼”四分体： “此”：是指被子植物花粉发育过程中，四个小孢子连在一起； “彼”：是指减数分裂过程中同源染色体两两联会后，每个四分体含有四条姐妹染色单体。 ②正确认识营养细胞和精子的关系： 精子就处在营养细胞的原生质中，营养细胞为花粉管的形成提供营养物质。 产生花粉植株的愈伤组织途径 花药中的花粉 丛芽 再分化 生根 植物体 脱分化 移栽 诱导 愈伤组织 花粉 分化 生根 移栽 诱导 脱分化 丛芽 植物体 （二）产生花粉植株的胚状体途径 胚状体 （三）影响花药培养的因素 月季的为MS培养基 阅读教材P38—39页，找出哪些因素能够影响花药的培养？ 1、材料的选择 2、培养基的组成 植物的种类 亲本植株的生理状况 花粉的发育期 亲本植株生长条件、材料的低温预处理、接种密度等 3、其他因素 （ ） （ ） 花期早期 单核期 1．选择花药时一般通过____确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是_________和___________，它们分别可以将细胞核染成____色和_____色。 2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用______________处理20min。该试剂的配制方法是将__________________按体积比为_______的比例混合均匀。 （一）材料的选取 焙花青-铬矾 阅读“（一）材料的选取”，回答下列问题： 镜检 醋酸洋红 蓝黑 红 卡诺氏固定液 无水酒精与冰醋酸 3 ：1 能否成功： 1、材料的选择 2、培养基的组成 （ MS培养基+不同比例的植物生长调节激素） 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 三 、影响花药培养的主要因素 （一）材料选取 2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法 将染色体染成红色 —常用方法 焙花青-铬矾法 花粉细胞核染成蓝黑色 。 1、从花药看： 从花粉看： 从花蕾看： 花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色） 花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色） 月季的初花期 单核靠边期 完全未开放的 为什么不选择使用单核期之前或之后的花药接种？ 单核期之前的花药，质地幼嫩，极易破碎。 单核期之后的花药，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难。 （二）材料的消毒 阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图： 花蕾 （_______） 清洗 吸干水分 消毒2～4min 冲洗3～5次 浸泡约30s （______） （__________） （____________） （_______） 70%酒精 无菌吸水纸 无菌水 无菌水 1%氯化汞溶液 1%次氯酸钙溶液 饱和漂白粉溶液 1%氯化汞溶液 说明：用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 思考： 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷