第八章 吸光光度法 一、比色法 二、分光光度法 三、分光光度计的类型 (一)、基本组成 2.单色器 3. 样品室 (二)、分光光度计的类型 3.双波长 * * 第三节 比色法、分光光度法及其仪器 一、目视比色法 目视比色法是一种用眼睛辨别颜色深浅,以确定待测组分含量的方法。一般采用标准系列法。即在一套等体积的比色管中配置一系列浓度不同的标准溶液,并按同样的方法配置待测溶液,待显色反应达平衡后,从管口垂直向下观察,比较待测溶液与标准系列中哪一个标准溶液颜色相同,便表明二者浓度相等。如果待测试液的颜色介于某相邻两标准溶液之间,则待测试样的含量可取两标准溶液含量的平均值。 方法的特点 a. 利用自然光,无需特殊仪器; b. 比较的是吸收光的互补色光; c. 目测,方法简便,灵敏度高; d. 准确度低(一般为半定量); e. 不可分辨多组分。 二、吸光光度法 1.方法原理 吸光光度法是借助分光光度计测定溶液的吸光度,根据朗伯-比耳定律确定物质溶液的浓度的方法。 常用的测定方法方法有比较法和标准曲线法。 2. 测定方法 a.比较法 比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液cs被测试液cx,在相同条件下显色后,测其相应的吸光度,分别为As和Ax,根据朗伯—比耳定律:
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