可乐中咖啡因含的测定(徐艳清).docVIP

浙江科技学院生物与化学工程学院 仪器分析实验报告 姓名：徐艳清 学号：3110422005 班级：化工专升本111班 实验名称：饮料中咖啡因的高效液相色谱分析——外标法定量 一、实验目的 （1）熟悉高效液相色谱仪的结构，并熟悉其分析操作； （2）理解反相化学键合相色谱法的原理与应用； （3）学习高效液相色谱保留值定性方法和归一化法定量。 二、实验原理 咖啡因属黄嘌呤衍生物，化学名称为1，3，7—三甲基黄嘌呤，是从茶叶或咖啡中提取的一种生物碱。咖啡因在咖啡中的含量约为1.2%~1.8%，在茶叶中约为2.0~4.7%。可乐饮料、止痛药等含咖啡因。咖啡因的分子式为，其化学结构式如下图： 在化学键合相色谱法中，若采用的流动相极性大于固定相极性，则称为反相化学键合相色谱法。该方法是目前应用最为广泛的色谱方法。本实验采用C18键合相色谱柱分离饮料中的咖啡因，即为一种反相色谱法。由于在一定的实验条件下，同一组分的保留值保持恒定，因此在同种条件下，将发酵产物中各组分的保留时间与标准品对照，即可确定该组分存在与否。本实验采用峰面积进行含量计算。通过紫外检测器进行检测，以咖啡因标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度作标准曲线，在根据试样中的咖啡因峰面积，由标准曲线计算出试样中咖啡因的浓度。 三、实验步骤