分子生物学研究方法习题.doc

分子生物学常用技术练习题1 ?【测试题】? 【名词解释】 1．blotting（印渍技术）?? 2．Southern blotting???? 3．Northern blotting???? 4．Western blotting 5．dot blotting???????? 6．DNA芯片技术????? 7．PCR????????????? 8．功能基因组学 9．蛋白质组学??????? 10．功能性克隆??????? 11．定位克隆???????? 12．转基因技术 13．核转移技术（克隆技术）?????? 14．基因剔除????????? 15．分子杂交 【参考答案】 一、 １．blotting（印渍技术）：是将存在于凝胶中的生物大分子转移于固定化介质上并加以检测分析的技术。 ２．Southern blotting：将限制性内切酶酶切电泳后的DNA转移至NC膜上，再与核酸探针杂交的技术。 ３．Northern blotting：将电泳后的RNA转移至NC膜上，再与核酸探针杂交的技术。 ４．Western blotting：将聚丙烯酰胺凝胶电泳后的蛋白质转移至NC膜上，再与另一标记蛋白质分子（如抗体）杂交的技术。 5．dot blotting：不经电泳分离直接将样品点在NC膜上用于杂交的技术。 6．DNA芯片技术：指采用原位合成或显微打印手段，将数以万计的DNA探针固化于支持物表面上，产生二维DNA探针阵列，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号来实现对生物样品快速、并行、高效地检测或医学诊断。由于常用硅芯片作为支持物，且在制备过程运用了计算机芯片的制备技术，故称基因芯片技术。 7．PCR：多聚酶链式反应，是一种快速简便的体外DNA扩增技术，能在很短时间内，将几个拷贝的DNA放大上百万倍。 8．功能基因组学：指探讨单一类细胞（组织）在其生命的一定时刻、一定条件所表达的基因的种类和数量；比较不同细胞之间、或同一细胞在不同条件下基因表达的差异。 9．蛋白质组学：是指细胞或组织中基因组所表达的全部蛋白质，尤其是指对于不同生命时期，或正常、或疾病、或给药前后的蛋白质变化所作的分析。 10．功能性克隆：指从对一种基因的功能的了解出发克隆该致病基因的策略。例如血友病的第Ⅷ因子基因是以此策略克隆成功的。 11．定位克隆：有时特指图位克隆，指从染色体定位、遗传作图或者物理作图出发逐步缩小范围，在特定的标记附近克隆该基因的策略。例如DMD致病基因是以此策略克隆成功的。 12．转基因技术：指将目的基因整合入受体细胞比如受精卵细胞或胚胎干细胞或者植物组织，然后使之发育成携带外源基因的个体。该个体能把目的基因继续传给子代，该技术称转基因技术。目的基因的受体动物就是转基因动物。 13．核转移技术即动物整体克隆技术。主要是指是将动物的体细胞核全部导入另一个体的去除了胞核的受精卵内，使之发育成个体的技术。 14．基因剔除：指有目的的去除动植物体内某种基因的技术，也叫基因靶向灭活。 15．分子杂交：在DNA复性时，如把不同DNA分子或DNA与RNA分子放在同一溶液中，只要这些核酸单链分子之间存在一定程度的碱基配对关系，就可在不同分子间形成杂化双链，这种现象称核酸分子杂交。 【填空题】 16．Southern blotting、Northern blotting和Western blotting是分别用于研究____ 、____ 和 ____ 转移的有关技术。 17．用PCR扩增DNA片段，在反应中除了用该DNA片段作为模板外，尚需加入____ 、____ 、____ 和____。 18PCR的基本反应步骤包括____ 、____ 和____ 三步。 *19．Sanger法DNA测序的基本步骤包括____ 、____ 、____ 和____ 四步 20．人类基因组计划的主要研究内容包括____ 、____ 、____ 、____和____。 21____ 和____。 22．目前克隆致病相关基因的主要策略有____ 、____ 和____。 23．血友病第Ⅷ因子基因的首次克隆成功所采用的克隆策略是____ ，而DMD（杜氏肌营养不良）致病基因的克隆所采用的克隆策略是____。 16．DNA??? RNA??? 蛋白质 17．引物??? Taq DNA聚合酶? DNTP???? 含Mg2+的缓冲液 18．变性??? 退火??? 延伸 19．模板-引物杂交??? 引物延长与合成阻断???? 电泳???? 放射自显影直读图 20．遗传图分析??? 物理图分析??? 转录图分析??? 序列图分析??? 资料的储存和利用 21．功能基因组学????? 蛋白质组学 22．功能性克隆???? 定位克隆??? 候选基因克隆 23．功能性克隆????? 定位克隆 【单