呫吨酮类衍生物的合成及其与生物大分子相互作用 .docVIP

呫吨酮类化合物的合成 及其与生物大分子的相互作用( 邹 兰 马 林 汪 波* 中山大学化学与化学工程学院，有机化学研究所 广州 510275 摘要 合成了四个羟基呫吨酮类化合物，并通过紫外-可见光谱法初步研究了它们与α-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶、DNA三种生物大分子的相互作用。发现1,3-二羟基呫吨酮对α-葡萄糖苷酶有显著的抑制作用， 1-羟基-3-（2-（1-哌啶）乙氧基）呫吨酮则在2.5×10-5mol/L浓度下对α-葡萄糖苷酶略有激活作用，并且能与DNA能产生相互作用。四个化合物均对酪氨酸酶有一定的的抑制作用，有关作用的机制和动力学研究有待进一步进行。 关键词 呫吨酮类衍生物 α-葡萄糖苷酶 酪氨酸酶 DNA 1 前言 呫吨酮又叫二苯并γ-吡喃酮，它的衍生物广泛存在于自然界中，是药用植物的有效成分之一。由于呫吨酮类衍生物在其线形排列的三个环上具有酚性官能团，大多具有丰富的生物活性和药用价值，如抗菌活性、抗炎活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性等[1]。化合物的生物活性一般和它们与生物大分子的相互作用如对某些酶活性的抑制作用或DNA的相互作用等密切相关的。因此，我们合成了四个有代表性结构的呫吨酮类化合物并初步研究了它们对α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶两种酶的抑制作用以及与DNA的相互作用。结果发现1,3-二羟基呫吨酮5b对α-葡萄糖苷酶有显著的抑制作用， 1-羟基-3-（2-（1-哌啶）乙氧基）呫吨酮6b则在2.5×10-5mol/L浓度下对α-葡萄糖苷酶略有激活作用，并且能与DNA能产生相互作用。四个化合物均对酪氨酸酶表现出一定的的抑制作用，有关作用的机制和动力学研究有待进一步进行。 2 实验 2.1 材料和仪器 (-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶、小牛胸腺DNA、对硝基苯酚-(-葡萄糖苷、L-多巴购自Sigma公司；水杨酸、间苯二酚、间苯三酚、硫酸二甲酯、碳酸钾、PPA等均为市售分析纯试剂；N-氯乙基哌啶为本实验室制备。 化合物结构通过VARIAN UNITY INOVA-500核磁共振仪，VG ZAB-HS质谱仪，Bruker公司Equinox FT-IR 55红外光谱仪表征，熔点测定用毛细管法，温度计未校正。 2.2 方法 2.2.1 羟基呫吨酮的合成： 1-羟基呫吨酮（5a）：在50mL的圆底烧瓶中加入1.38g（0.01mol）水杨酸和1.11 g（0.01mol）间苯二酚，再加入15mLPPA，加热搅拌，在油温为180℃下反应4h。反应完毕后，将反应体系倒入正在搅拌的冰水混合物中，形成混浊溶液。过滤，并用乙酸乙酯萃取滤液，浓缩滤液，与滤渣合并，使用体积比为35mL:4d石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行柱层析分离，得到浅黄绿色产物。熔点：140℃；文献值[2]：149℃；MS（FAB）m/z：213（M+H）；IR（KBr）υmax（cm-1）: 3424, 3083, 2923, 2853, 1648, 1611, 1478, 1460, 1376, 1285, 1234, 1047, 814, 768；1H NMR（CDCl3）δ：12.64 (1H, s, 1-OH ), 8.28 (1H, dd, J = 2.0, 7.0 Hz, Ar-H ), 7.76 (1H, m, Ar-H ), 7.60 (1H, dd, J = 8.0, 8.5Hz, Ar-H ), 7.47 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H ), 7.40 (1H, m, Ar-H ), 6.93 (1H, d, J = 8.5 Hz, Ar-H ), 6.80 ( 1H, dd, J = 1.0, 8.0 Hz, Ar-H )。 1，3-二羟基呫吨酮（5b）的合成： 称取1.38 g（0.01mol）水杨酸和1.28g（0.01mol）间苯三酚，反应及分离纯化步骤同5a，柱层析洗脱剂为体积比为10:1的石油醚-乙酸乙酯。得到产物 0.46 g，浅黄绿色，产率23％；熔点：251-252℃ ；文献值[3]：256-258℃；MS（FAB）m/z：229（M+H）；IR（KBr）υmax（cm-1）:3330, 3078, 1655, 1611, 1568, 1492, 1349, 1286, 1220, 1160, 826, 760；1H NMR（CD3COCD3）δ：12.92 (1H, s, 1-OH ), 9.89 (1H, br, 3-OH ), 8.21 (1H, m, Ar-H ), 7.85 (1H, m, Ar-H ), 7.55 (1H, m, Ar-H ), 7.47 (1H, m , Ar-H ), 6.45 (1H, d, J = 2.5 Hz, Ar-H ), 6.28 (1H, J = 2.