可溶性还原糖脂蛋白质的鉴定.docVIP

学案六实验一可溶性还原糖脂肪蛋白质的鉴定 解读两纲 1.识记鉴定实验所用的材料，懂得选材的要求。 2.掌握实验原理、步骤，理解实验目的、方法。 3.学会制备生物组织样液，正确选用鉴定试剂，并能按规范的要求操作，独立完成鉴定工作。 4.明确观察对象，正确说出鉴定过程中样液的颜色变化，并能用准确的语言解释实验现象，作出实验结论。 5.能熟练制作徒手切片，临时装片和使用低倍显微镜，了解高倍显微镜的使用方法。 6.具备验证相关生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理；能对一些生物学问题进行初步的探究性研究。 高考热线 1.题型以选择题为主，也可能以简答题出现，重点是以对比的方式考查相关实验的异同点。 2.以教材实验为依据，设置实验设计题是今后考查的重点，如“设计实验证明淀粉酶是蛋白质”，就是依据教材中的实验3的原理和步骤。 学法指点 1.运用对比的方法认识三种物质的鉴定原理、过程及注意事项。 2.对比三种物质鉴定过程中的相同点和不同点，重点掌握试剂使用上的区别。 3.根据所学的原理鉴定类似物质，设计相应的实验程序。 教材梳理 （一）实验原理 生物组织中含有可溶性还原糖（如_______、_______、________）____________+2mL________________，振荡试管，（溶液_______色?），________2min左右，观察溶液颜色变化。（________色→棕色→_________色）。 2.脂肪的鉴定 (1)切片制作：用花生子叶作徒手切片。 (2)染色：1块载玻片+切片+ 3滴________染液，3min后吸去染液+ 2滴50%________溶液去浮色，吸去后+ 2滴__________，盖盖玻片。 (3)镜检鉴定：先用低倍镜观察，找到子叶最薄处，再用高倍镜观察。（圆形的脂肪颗粒为_____色）。 3. 蛋白质的鉴定 (1) 制备样液：大豆切片、________、_______。 (2) 鉴定：1 支试管+2mL黄豆组织样液+2mL________________，振荡试管（溶液_____色），+4滴______________，________试管，观察溶液颜色变化。（______色→______色→_______色）。 （五）结论与讨论 1.结论：从斐林试剂与苹果样液作用、苏丹III染液与花生种子作用、双缩脲试剂与大豆样液作用的颜色变化可以得出：___________________________________________________________。 2. 讨论鉴定依据。因为某些化学试剂与生物组织中的有关_________发生一定的化学反应，产生有固定颜色的新化合物。故可根据待检物与某些化学试剂反应的____________,如橘黄色、_________色、______色等，鉴定生物组织中含有_______、可溶还原糖和___________。 五、疑难精析 1．生物组织中的还原糖是指分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或酮基)的糖，如葡萄糖、麦芽糖、果糖，淀粉、蔗糖不具有还原性，斐林试剂只能检验可溶性还原糖的存在，而不能鉴定可溶性非还原糖或不溶性糖。 2．可溶性还原糖鉴定实验的选材原则。选用可溶性还原糖含量较高的生物组织，而且组织的颜色较浅，或近于白色。常用的植物组织是：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。双子叶植物光合作用的主要产物为淀粉，其叶不理想。有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾等，其叶内含有大量的可溶性单糖，但由于叶片中叶绿素颜色较深，影响鉴定时实验现象的观察，也不宜作实验材料。 3．可溶性还原糖鉴定实验的关键性的步骤在于斐林试剂现用现配及用量。很不稳定，故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g／mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g／mL的CuS04溶液)分别配制、储存；使用时，再临时配制，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完混合均匀后[得到淡蓝色的Cu(OH)2沉淀的悬浊液]立即使用。如果过早混合会产生Cu(OH)2沉淀，加入到组织样液中并加热时会产生黑色CuO沉淀。而临时混合所得斐林试剂立即用于实验，即可使新制的Cu(OH)2作氧化剂与可溶性还原糖发生氧化-还原反应，生成砖红色的Cu2O沉淀。溶液的变化过程：淡蓝色→棕色→砖红色沉淀。 4．在可溶性还原糖的鉴定中，在对盛有组织样液与斐林试剂混合物的试管直接用酒精灯加热易破，因为试管受热不均匀，若要避免此现象产生应改用水浴加热。此时试管底部不要触及烧杯底部，试管口不要朝向实验者，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。 5．双缩脲试剂并不是双缩脲分子。所谓双缩脲是由两分子尿素经脱氨缩合而成的化合物。该化合物在碱性溶液中能与CuSO4反应产生紫色络合物，此反应称双缩脲反应。蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键，因此也