实验十一食品中亚硫酸盐含量测定.doc

实验十一、食品中亚硫酸盐含量测定 1、目的要求 在食品的生产加工过程中，为使食品保持其特有的色泽，常加入漂白剂，从漂白剂的作用机理上看，可分为还原型和氧化型两大类，它们分别具有一定的还原能力和氧化能力。目前，在我国食品行业中，使用较多的是二氧化硫和亚硫酸盐。因两者本身没有营养价值，也非食品中不可缺少成分，而且还有一定的腐蚀性，对人体健康也有一定的影响，因此在食品中添加应加以限制。学习盐酸副玫瑰苯胺显色比色法测定食品中亚硫酸盐的实验原理，掌握实验的操作要点及测定方法。 2、实验原理 亚硫酸盐与四氯汞钠反应，生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物，此络合物于波长550nm处有最大吸收峰，且在一定范围内其颜色的深浅与亚硫酸盐的浓度成正比，可以定量测定。结果以试样中二氧化硫的含量表示。 3、仪器与试剂 3.1 试剂 3.1.1 四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6.0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL放置过夜，过滤后备用。 3.1.2 1.2%氨基磺酸铵溶液 12g/L 。 3.1.3 甲醛溶液（2g/L）：吸取0.55mL无聚合沉淀的甲醛（36%），加水稀释至100 mL，混匀。 3.1.4淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100mL沸水中，搅拌煮沸，放冷备用，此溶液临用时配制。 3.1.5 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL 3.1.6 乙酸锌溶液：称取22g乙酸锌溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀释至100 mL。 3.1.7 盐酸副玫瑰苯胺溶液：称取0.1g盐酸副玫瑰苯胺（C19H18N2CL.4H2O:p-rosaniline hydrochlo-ride）于研钵中，加少量水研磨使溶解并稀释至100mL。取出20mL，置于100mL容量瓶中，加盐酸（1+1）充分摇匀后使溶液由红变黄，如不变黄再滴加少量盐酸至出现黄色，再加水稀释至刻度，混匀备用。 3.1.8 碘溶液[c 1/2I2 0.100 mol/L]。 3.1.9 硫代硫酸钠标准溶液[c Na2S2O3·5H2O 0.100mol/L]。 3.1.10 二氧化硫标准溶液：称取0.5g亚硫酸氢钠，溶于200mL四氯汞钠吸收液中，放置过液，上清液用定量滤纸过滤备用。 吸取10.0 mL亚硫酸氢钠-四氯汞钠溶液于250mL碘量瓶中，加100mL水，准确加入20.00mL碘溶液（0.1mol/L），5mL冰乙酸，摇匀，放置于暗处，2min后迅速以0.100mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加0.5mL淀粉指示剂，继续滴定至无色。另取100mL水，准确加入0.1mol/L碘溶液20.0mL、5mL冰醋酸，按同一方法做试剂空白试验。 二氧化硫标准溶液的浓度按下式下式进行计算： 式中：X—二氧化硫标准溶液浓度，单位（mg/mL）； V1—测定用亚硫酸氢钠-四氯汞钠溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，单位（mL）； V2—试剂空白消耗代硫酸钠标准溶液体积，单位（mol/L）； C—硫代硫酸钠标准溶液的摩尔浓度，单位（mol/L）； 32.03—每毫升硫代硫酸钠[c Na2S2O3·5H2O 1.000mol/L]标准溶液相当于二氧化硫的质量 mg 。 3.1.11 二氧化硫使用液：临用前将二氧化硫标准溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫升相当于2μg二氧化硫。 3.1.12 氢氧化钠溶液（20g/L）。 3.1.13 硫酸（1+71）。 3.2 仪器 分光光度计。 4、实验步骤 4.1 样品处理 4.1.1 水溶性固体试样如白砂糖等可称取约10.00g均匀试样（试样量可视含量高低而定），以少量水溶解，置于100mL容量瓶中，加入4mL氢氧化钠溶液（20g/L），5min后加入4mL硫酸（1+71），然后加入20mL四氯汞钠吸收液，以水稀释至刻度。 4.1.2 固体试样如饼干、粉丝等可称取5.0g～10.0g研磨均匀的试样，以少量水湿润并移入100mL容量瓶中，然后加入20mL四氯汞钠吸收液，浸泡4h以上，若上层溶液不澄清可加入亚铁氰化钾溶液 及乙酸锌溶液各2.5mL，最后用水稀释至100mL刻度，过滤后备用。 4.1.3 液体试样如葡萄酒等可直接吸取5.0～10.0mL试样，置于100mL容量瓶中，以少量水稀释，加20mL四氯汞钠吸收液，摇匀，最后加水至刻度，混匀，必要时过滤备用。 4.2 测定 4.2.1 吸取0.50ml～5.0mL上述试样处理液于25mL带塞比色管中。 4.2.2 另吸取0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.50、2.00mL二氧化硫标准使用液（相当于0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、3.0、4.0μg