抑制幽门杆菌发酵乳之研究.doc

抑制幽門桿菌發酵乳之研究 Study on the fermented milk for inhibit Helicobacter pylori 研究生：陳義昌 Chen Yi-Chang 指導教授：謝寶全 Xie Bao-Quan 【摘要】 　　本研究收集市售商品及自然界樣品分離出生長快速之乳酸菌，並測試對幽門桿菌的抑制能力，挑選出兩株不同來源的乳酸菌，經菌種鑑定後，認定分離自市售發酵乳的2號菌株為Lactobacillus paracasei；分離自醃漬蔬菜的26號菌株為Lactobacillus plantarum，兩株乳酸菌發酵牛乳之後能在培養皿上抑制幽門桿菌BCRC 17023和BCRC 17027，產生17 - 22 mm的抑菌圈。L. paracasei菌株和產生的乳酸為抑制幽門桿菌的主要原因，在發酵乳中能夠抑制幽門桿菌產生明顯的抑菌圈，而發酵乳上清液 FMS 在體外2個小時能抑制45%的幽門桿菌，並降低幽門桿菌所產生的尿素酶活性56 %；L. plantarum能分泌出某種抑菌物質，在中性FMS中2個小時能抑制33 - 37%的幽門桿菌，並降低40 - 60%的尿素酶活性，乳酸存在的低pH值的條件下，FMS可以在1個小時內殺死試管中所有的幽門桿菌 8.8 Log CFU/mL 。但是兩株乳酸菌的發酵乳經過100℃，30分鐘殺菌後則失去對幽門桿菌的抑制能力。動物試驗中，兩株乳酸菌的發酵乳讓小鼠連續飲用3週，能減少小鼠胃中之幽門桿菌數量約3個對數值，並相對抑制尿素酶活性反應。顯示本研究之乳酸菌可以預防幽門桿菌感染。在乳酸菌的安全性上，ICR、C57BL/6J兩個品系的小鼠飲用發酵乳6 - 8週後，都沒有發生生理上的明顯差異及病變。在發酵乳的應用上，L. paracasei對脫脂乳的發酵性較好，可以直接發酵脫脂乳，但無法忍受消化道環境之低pH值 pH 3.0 和高濃度0.3%膽鹽；L. plantarum需要添加0.5%以上的yeast extract於脫脂乳中，才可以得到較好的發酵性，而此菌對消化道環境適應性良好，可以存活於腸胃中。兩株乳酸菌在共同生長時不會有互相抑制的情形，並在製成發酵乳後儲藏於4℃中60天後，仍可保有活菌數7.05 Log CFU/mL。綜合上述，本研究所使用的兩株乳酸菌可以預防幽門桿菌感染，在食用上為安全無虞，可以用於製造發酵乳並具有良好的儲藏性。 關鍵字：乳酸菌、抑制、幽門桿菌 【Abstract】 Isolated strains of lactic acid bacteria LAB from commercial production and natural sources were tested for their efficiency in inhibiting Helicobacter pylori in this study. The No.2 strain of Lactobacillus paracasei was isolated from commercial fermented milk and the NO.26 strain of Lactobacillus plantarum was isolated from pickled vegetables. Two LAB strains could inhibited H. pylori BCRC 17023 and BCRC 17027 on the fermented milk plate and produced the inhibitory zones were 17 to 22 mm. The main reasons of inhibition H. pylori were alive bacteria and produced lactic acid by L. paracasei that was incubated with the fermented milk could produce obvious inhibitory zone. In vitro test, fermented milk supernatant FMS of L. paracasei could kill 45% H. pylori and decreased 56% the urease activity in 2 hours. In addition, L. plantarum could excrete certain bacteriocins. In vitro test, neutral fermented milk supernatant NFMS of L. plantarum could