第八章 蛋白质和氨基酸的测定 [恢复].ppt

第八章 蛋白质和氨基酸的测定 [恢复]

水杨酸比色法 原理:样品中的蛋白质经硫酸消化而转化成铵盐溶液后,在一定的酸度和温度条件下可与水杨酸和次氯酸钠作用生成兰色化合物,在660nm处比色测定,求出样品的含氮量,进而计算出蛋白质的含量。 (四)其他常用方法 福林-酚比色法; 考马斯亮蓝染料比色法; 红外光谱法; 比浊法; …… 我的是毛线 是棉线? 是毛线? 蛋白质灼烧时,会有烧焦羽毛的气味。 感知生活 你对蛋白质知多少? 1、你知道怎么鉴别吗? 感知生活 你对蛋白质知多少? 2、你知道如何鉴定豆腐富含蛋白质吗? 浓硝酸 呈黄色 第三节 氨基酸的定量测定 (一)甲醛滴定法 1、双指示剂甲醛滴定法 (1) 原理 氨基酸具有酸性的-COOH和碱性的-NH2。它们相互作用而使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时,-NH2与甲醛结合,从而使其碱性消失,使-COOH显示出酸性,用碱标准溶液来滴定-COOH,并用间接的方法测定氨基酸的总量。 方法特点及应用 此法简单易行、快速方便。脯氨酸与甲醛作用时产生不稳定的化合物,使结果偏高;酪氨酸含有羟基,滴定时会消耗碱液使结果偏高;溶液中若有铵存在也可与甲醛反应,往往使结果高。 特别适合浅色样品的测定 (2) 操作方法 移取含氨基酸约20~30mg的样品溶液2份。 中和游离酸(用中性红作指示剂,先测定其他游离酸的含量):1份加入3滴中性红指示

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