狸藻捕虫囊及共生藻类之研究.doc

臺北市第4屆中小學科學展覽會 作品說明書封面 科　　別： 組　　別： 作品名稱： 關 鍵 詞：、、 編 號： 製作說明： 1.說明書封面僅寫科別、組別、作品名稱及關鍵詞。 2.編號由臺北市立統一編列。 3.封面編排由參展作者自行設計。  摘要 黃花狸藻(Utricularia aurea)為一種水生的食蟲植物，藉由特別的負壓機制將微生物吸入捕蟲囊，再進一步消化。經由複式顯微鏡觀察，捕蟲囊內有許多微生物，尤其以裸藻(Euglenoidea)占大多數。在經過實驗後，證實捕蟲囊內的裸藻密度比新山夢湖水域中的裸藻密度高出26倍。 本次實驗主要是探討黃花狸藻與裸藻之間的關係，培養裸藻時，發現用NC培養液培養後，裸藻皆會死亡；不過用狸藻分泌的黏液培養，裸藻卻能活著，表示狸藻對裸藻是有益處的，確認其之間有片利共生之關係。 壹、研究動機 自從高一的寒假加入生物專題研究的課程，我們就開始著手找尋科展題目。打從一開始找到一篇關於「毛氈苔分泌酵素分解昆蟲幾丁質外殼」的相關文章後，我們就對食蟲植物產生濃厚的興趣。 前前後後看了不下十篇關於食蟲植物的文章，如豬籠草、捕蠅草、毛氈苔、瓶子草、狸藻……。直到我們看到Plachno Bartosz J. 於2008年所發表的『Algae Commensal Community in Genlisea Traps』這篇論文後，我們得知獵物與狸藻間可能不是單純的掠食關係，有可能是互利共生的關係。加上高一基礎生物第三章第二節所學有關共生的觀念，更是讓我們對此題目有更強烈的動機。 生物間的相互關係，可分為下列幾種：競爭、捕食、共生、寄生等，而這些關係正是構成生物群落的基礎，即使是只有任意二物種間可能也會有一連串交互作用，並且可以經由這一連串交互作用影響到對方的生長、生殖及行動。 而我們經複式顯微鏡觀察發現捕蟲囊內的裸藻相對原生水域較多，加上黃花狸藻的數量較少，希望能藉此次研究，研究出裸藻對黃花狸藻的益處，為黃花狸藻的復育盡一份心力。 貳、研究目的 一、觀察黃花狸藻與其生長環境。 二、觀察捕蟲囊內部的藻類，並探討黃花狸藻對內部微生物的益處。 三、研究捕蟲囊內的藻類對黃花狸藻的益處。 參、研究設備及器材 項目 數量 項目 數量 複式顯微鏡 2台 血球計數器 1台 解剖針 4支 錐形瓶 6個 滴管 2支 鑷子 4支 桌上酸鹼度計 1台 溫度計 2支 蓋玻片 數片 載玻片 數片 顯微測微尺 1片 過濾裝置 1組 抹布 數條 濾膜 數片 標籤紙 數張 離心機 1台 顯微鏡相機 1台 電子秤 1台 肆、研究過程或方法 一、觀察黃花狸藻與其生長環境 透過紀錄黃花狸藻生長環境的溫度、酸鹼度，及當地的水生植物，來加強我們對此物種的認識。 二、觀察捕蟲囊內部的藻類，並探討黃花狸藻對內部微生物的益處 （一）經由複式顯微鏡作直接的觀察 1.利用不同倍率的物鏡來觀察捕蟲囊的形體及其內部之微生物。 2.利用解剖針將捕蟲囊剖開後，再利用不同倍率的物鏡來觀察游出之微生物。 （二）計算新山夢湖的藻類密度 1.取新山夢湖的水約500ml，置於燒杯中。 2.製作定量片： （1）搖晃燒杯，使藻類細胞混和均勻。 （2）取三個試管，裡面各加入5ml新山夢湖採集回的水樣。 （3）在三個試管中各用滴管加入一滴福馬林(Formalin)，靜置約十分鐘，使水樣中的藻類皆死亡，利於之後的觀察。 （4）加入3~5滴的Coomasie blue染劑，然後搖晃試管使沉澱的藻類和染劑混合均勻。 （5）將步驟（4）的試管靜置於熱水(60℃)中十分鐘(圖1)後，將試管取出，置於室溫下冷卻。 （6）將過濾裝置(圖2)及濾膜組裝好。(過濾裝置：1公升錐形瓶、抽氣幫浦、過濾器、鑷子，濾膜(圖3)：Sartorius 11406-25-N，Cellulose Nitrate Filter、Pore size：0.45μm3~5ml的二次水(經兩次蒸餾後的水)至過濾器中，再將一個試管中的混合液搖晃均勻後倒入過濾器中。 （8）開抽氣機抽氣，讓混和液流經濾膜(此時濾膜會呈現藍色)。 （9）待濾膜上的水分被吸乾後，用鑷子取下濾膜，用剪刀剪成5×5格(每格邊長為25mm)大小的正方形。 （10）將剪好的濾膜放在載玻片上，一起放在加熱板上烘乾。 （11）待濾膜乾燥後，用鑷子夾起濾膜，滴一滴鏡油(Immersion oil)在載玻片上，再 將濾膜放置在鏡油上(圖4)。 （12）待濾膜被鏡油完全浸潤呈透明狀後，放上蓋玻片。 （13）將載玻片與蓋玻片之間的氣泡排出後，即可在複式顯微鏡下觀察。 （14）重複步驟（7）到（13），將剩下的兩個試管做完同樣的實驗。