csj酵母的制片和简单染色.docVIP

酵母的培养和制片 摘要：实验用酵母合成培养基和麦氏琼脂培养基斜面对酿酒酵母进行培养，用美兰染色，观察到酵母的形态和出芽状况，比较了3min及30min时菌体死活比例；用孔雀绿和番红进行复染，观察到了子囊孢子。 关键词：酵母 出芽 死活细胞 子囊孢子 前言：单个酵母的个体是常见细菌的几倍甚至几十倍，大多数采取出芽方式进行繁殖，也可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。由于细胞个体大，采用涂片法可能损伤菌体，一般采用美兰染液水浸法制片观察酵母形态。美兰染液水浸法可以鉴别酵母细胞的死活。美兰对细胞无毒，其氧化型蓝色，还原型无色，活细胞由于新陈代谢产生较强还原力，染色后呈无色，死细胞染色后呈蓝色。 1材料和方法 1.1 材料 1.1.1菌种 酿酒酵母 1.1.2 溶液、试剂和仪器 无菌水 0.1%稀释美兰 孔雀绿 番红 95%乙醇 酵母合成培养基 麦氏琼脂培养基 普通光学显微镜 镊子 载玻片 盖玻片 酒精灯 接种环 滴管 试管夹 表1酵母合成培养基配方 项目 水 酵母膏 葡萄糖 蛋白胨 PH 用量/g 100mL 0.5 2 1 自然 1.2方法 1.2.1培养基配制及接种 1.2.1.1配制酵母合成培养基和麦氏琼脂培养基各100mL。将液体培养基分装到三个三角瓶中，每瓶20-30mL，麦氏琼脂培养基分装到十个试管中。 1.2.1.3将分装好的液