第十章细胞培养技术和培养箱习题参考答案.doc

第十章 细胞培养技术和培养箱习题 参考答案 一、名词解释 1. 细胞培养：从生物体内取出组织或细胞，在容器内模拟体内生理环境，于无菌、适当温度和一定营养条件下进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能，以便于我们观察研究。 2. 细胞培养传代: 当细胞增殖至一定密度后，分离出一部分细胞接种到其他容器，并及时更新培养液，使细胞增殖继续，这一过程叫传代。 3. 原代细胞培养：从体内取出细胞接种培养到第一次传代叫原代细胞培养，原代细胞一经传代后便称为细胞系。 4.无限细胞系：细胞系进入传代期，细胞增殖旺盛，传代后细胞获得永生性即永久增殖的能力，称为无限细胞系（或连续细胞系）。 5. 细胞融合：将来源于不同细胞核的染色体结合到同一个核内，形成一个合核体的杂种细胞称为细胞融合。 6. 细胞治疗：用体外培养的正常细胞，或者是导入外源基因的细胞，也可利用由干细胞诱导分化而来的特定细胞，植入患者病变部位以代偿病变细胞丧失的功能。 7. 培养箱：是细胞培养必需设备，可提供不同细胞与细菌生长所需适宜温度和气体成份的装置。有普通的电热恒温培养箱、CO2培养箱和厌氧培养箱等类型。 8. 缓冲室：是一个传递舱，具有内外两个门，其后部与一个间歇真空泵相连，缓冲室随时可自动抽气换气造成无氧环境。 9．手套操作箱：厌氧培养箱前面安装的操作者塑料手套，使操作箱与外界隔绝。操作箱内侧门与缓冲室相通，由操作者用塑料手套控制开启。当标本、培养基等在缓冲室内变为厌氧状态时，便可打开内门将它们移入工作室。 二、选择题 【A型题】 1．B 2．D 3．B 4．A 5．D 6．A 7．E 8．D 9．B 10．D 【X型题】 1．ABCD 2． ABCD 3．ABC 4．ABCD 5．ABC 三、简答题 2含量，产生厌氧状态。自动换气功能可由按钮控制，培养箱与真空泵相连，当所有要转移的物品被放入缓冲室后，关闭外门，进行自动去除缓冲室中的氧气。循环换气预设三个气体排空阶段、两个氮气净化阶段和一个缓冲室平衡气压阶段。其换气过程是：①气体排空；②N2净化；③气体排空；④N2净化；⑤气体排空；⑥气压平衡：平衡缓冲室内的气压与气体成分（作用时间1分31秒，延迟时间4分32秒）。此时，厌氧状态灯显示为ON，此时即可将内门打开，钯催化剂将除去余下的少 量O2。 （2）催化除氧系统 箱内采用钯催化剂将除去余下的少量O2，可催化无氧混合气体内的微量氧气与氢气反应，生成水后再由干燥剂所吸收。催化剂片和干燥剂片分别密封于筛网中组成三层催化剂片。三层催化剂薄片插入气流系统，有风扇使箱内气体得到连续循环。 8．简述厌氧培养系统的基本结构。 答：为密闭的大型金属箱，由手套操作箱和缓冲室（传递箱）两个部分组成，操作箱内还附有小型恒温培养箱。缓冲室是一个传递舱，具有内外两个门，在其后部与一个间歇真空泵相连，缓冲室随时可自动抽气换气造成无氧环境，在缓冲室的后部，连接有厌氧气体管。手套操作箱的前面装有塑料手套，操作者双手经手套伸入箱内操作，使操作箱与外界隔绝。操作箱内侧门与缓冲室相通，由操作者用塑料手套控制开启。小型恒温培养箱中细胞培养室的操作温度通常是固定35℃，变化范围是“（室温+4）℃ 70℃”，控制精度为±0.3℃。当温度超高温时，会发出报警。 9．如何使用厌氧培养系统？ 答：所有要转移的物品被放入缓冲室后，关闭外门；按下“Cycle Start”钮即可进行自动去除缓冲室中的氧气。经循环换气的三个气体排空阶段和两个氮气净化阶段，使缓冲室气体达98％的无氧状态，再经缓冲室气压平衡，操作箱与缓冲室平衡，厌氧状态灯显示为ON，此时即可将内门打开，钯催化剂将除去余下的少量O2。操作者经手套伸入箱内进行标本接种、培养和鉴定等全部工作。