培训课件-基层培训免疫学技术.pptVIP

2、操作和反应步骤 （1）双抗体夹心法 以测定HCG为例，如图1所示，试条中G区为金标记的鼠抗人HCG，T区为包被的抗人HCG，C区为包被的羊抗小鼠IgG抗体。 ①测试时在A区滴加尿液（或将A区浸入尿液中），通过层析作用，尿液向B区移动，流经G区时将金标记抗HCG复溶，若尿液中含HCG，即形成金标记抗HCG和HCG复合物。 ②尿液继续移行至T区时，HCG复合物与抗HCG结合,形成金标记抗HCG-HCG-抗HCG复合物，金标抗HCG在T区显示红色线条，为阳性反应。 ③多余的金标记鼠抗人HCG抗体继续移行至C区时，被羊抗小鼠IgG抗体捕获，而显示出红色质控线条。如尿中不含HCG，在T区不出现红色线条，仅在C区出现红色线条，表示试验结果为阴性。如C区无红色线条出现,表示试验失败，可能为试剂条失效。见图3。 图1 斑点金免疫层析试验 图2 斑点金免疫层析试验双抗体夹心法原理示意图 竞争法原理示意图 图3 斑点金免疫层析试验（双抗体夹心法）结果判断示意图 （1）测定时待测标本加于A区，若待测标本中含有抗原，流经G区时结合金标抗体，形成待测抗原和金标记抗体复合物。 （2）当复合物移至T区时，因无足够的游离金标抗体与膜上标准抗原结合，T区无棕红色线条出现，结果为阳性。若标本中不含待测抗原，游离金标抗体则与T