论文名称(中文) MiR.docVIP

論文名稱 中文 MiR-449a在細胞自噬和Ras致癌基因相關腫瘤形成之角色 論文名稱 英文 The role of miR-449a in autophagy and Ras oncogene related tumorigenesis 研究生 中文 楊于嬋 研究生 英文 Yu-Chan Yang 中文摘要 細胞自噬 Autophagy 在許多正常生理及疾病過程中扮演重要角色，包含老化、神經退化、及腫瘤生成。Ha-ras 為一種致癌基因，其可以誘發細胞自噬並誘發腫瘤發生。MicroRNAs miRNAs 是一群非編碼的小RNAs，藉由轉譯的降解或抑制轉錄來抑制目標基因的表現。細胞自噬與miRNAs皆與腫瘤形成有關，然而目前三者之間的關係及作用機制仍不清楚。我們之前的研究發現，在NOD/SCID 小鼠中，細胞自噬缺失與野生型的小鼠胚胎纖維母細胞中 MEF 比較，若前者高量表現突變的Ha-ras致癌基因，會誘發較大的腫瘤生成。因此，細胞自噬在ras相關腫瘤生成過程中扮演抑制的角色。本篇研究探討細胞自噬是否誘導某些miRNAs表現量增加而抑制腫瘤發生。我們利用誘導或抑制細胞自噬的方式篩選，挑選出細胞自噬正向調控的miR-449a。透過pyrosequencing偵測，甲基化不會影響miR-449a的表現，因此，miR-449a在轉錄 transcription 階段可能透過其他機制來調控。In vitro實驗中証實miR-449a可抑制細胞移動與細胞群落的生長。進一步在NOD/SCID小鼠模式中証實miR-449a具有抑制腫瘤生長的能力。而由三個軟體Targetscan，miRBase和picTar預測相互比對得出，可能與腫瘤形成有關的miR-449a標的基因，透過mRNA的分析，Lef1可能是miR-449a的標的基因。因此，在細胞自噬下miR-449a會被正向調控，進而抑制腫瘤生成。透過本篇研究，miR-449a可能成為腫瘤治療上的一個標的。 英文摘要 Autophagy plays an important role in pathophysiologic process including aging, neuronal degeneration, and tumorigenesis. Ha-ras, an oncogene, can induce autophagy and promote tumorigenesis. MicroRNAs miRNAs , a group of non-coding RNAs, suppress target-mRNA expression either by transcriptional degradation or by translational inhibition. Autophagy and miRNAs are all involved in tumorigenesis, however, the relationship among them is still unclear. We previously showed that overexpression of mutant Ha-ras oncogene in autophagy deficient mouse embryo fibroblast MEF cells induces larger tumor formation compared with wild-type MEF cells in NOD/SCID mice, indicating that autophagy plays a suppressive role in Ras-related tumor formation. In this study, we are interested in whether autophagy inhibits tumorigenesis through up-regulation of miRNAs. Autophagy-related miRNAs was identified by autophagy inducers and inhibitors. Among them, miR-449a was significantly up-regulated under autophagic conditions. Our data showed that methylation does not affect miR-449a expression by pyrosequncing indicating other mechanism s is responsible for t