论文名称(中文) YAP1与RUNX3交互作用并增强非小细胞肺癌之放射.docVIP

論文名稱 中文 YAP1與RUNX3交互作用並增強非小細胞肺癌之放射敏感性 論文名稱 英文 YAP1 interacts with RUNX3 and enhances radio-sensitivity of non-small cell lung cancer 研究生 中文 陸致信 研究生 英文 Jhih-Sin Lu 中文摘要 Hippo pathway在許多生物性調控上為一重要角色，包含細胞生長、細胞凋亡和器官發育。Yes-associated protein 1 YAP 功能屬於轉錄輔因子，可決定hippo路徑的訊息傳遞及功能。YAP 於腫瘤生中的角色可成為癌蛋白或在細胞去氧核醣核甘酸受損反應時做為腫瘤抑制因子。 YAP於細胞中確切的角色取決於和不同轉錄因子的結合。雖然YAP 和腫瘤抑制因子RUNX3於試管中的交互作用以被報導,但此一交互作用於細胞內的功能性調控仍然未知。 在我們的先前研究中顯示RUNX3可藉由轉錄調控，於胃癌細胞中抑制Akt的基因表現。為了探討YAP 和RUNX3的交互作用是否參與Akt 的表現調控,我們於細胞株偵測RUNX3和YAP的蛋白表現並發現RUNX3和YAP普遍表現於於非小細胞肺癌細胞中。利用穀胱胺酸沉降試驗和免疫共沉澱實驗中確認RUNX3 和YAP透過脯氨酸motif和雙色胺酸區域於試管中和細胞中交互作用。將RUNX3的脯氨酸motif 點突變則中斷和 YAP的交互作用。RUNX3和YAP於細胞內的為致主要在核周邊區域,暗示著YAP可能影響RUNX3的入核作用。於非小細胞肺癌細胞中過表現 YAP 會減少Akt及其下遊β-catenin 和 Cyclin D1的蛋白表現。於YAP穩定過表現的非小細胞肺癌細胞株H1299中Akt蛋白表現同為減少。於H1299細胞中穩定減弱YAP基因表現則增加Akt, β-catenin 和Cyclin D1的蛋白表現，顯示 YAP可能為一負向調控 Akt基因表現的調節因子 我們並進行Akt基因啟動子報導試驗驗證YAP對Akt啟動子的調控。如同先前於胃癌細胞的研究，RUNX3可在H1299細胞中抑制Akt啟動子的活性.細胞中過表現 YAP則降低Akt啟動子活性， 減弱YAP基因表現則增加Akt啟動子活性。將Akt啟動子上的RUNX3結合位做突變則阻止YAP抑制Akt promoter的活性。減弱YAP基因表現可減少非小細胞肺癌細胞株的抗放敏感性。在RUNX3和YAP交互作用的研究裡提供些證據來支持YAP於去氧核醣核酸受損反應中的腫瘤抑制因子的角色。 英文摘要 Hippo pathway plays an essential role in many biological regulations, including cell proliferation, apoptosis and organ development. Yes-associated protein 1 YAP is a transcriptional cofactor which determines the signaling and function of Hippo pathway. The role of YAP in could be a oncoprotein in tumorigenesis or tumor suppressor in cell DNA damage response. The definite role of YAP in cell is dependent on the binding of different transcriptional factors. Although the binding of YAP and the tumor suppressor, RUNX3 had been reported in vitro, the functional regulation in cell is still unclear. In our unpublished study show that RUNX3 represses Akt protein expression through transcriptional regulation in gastric cancer cells. To investigate if the interaction of YAP and RUNX3 is involved in the regulation of Akt gene expression, we detect the RUNX3 and YAP protein expression in cell lines and