高效液相色谱法(HPLC) 三、化学键合相色谱法(分配+吸附) 反相离子对色谱 反相色谱中,在极性流动相中加入离子对试剂,使被测组分与其中的反离子形成中性离子对,增加k和tR,以改善分离 反相离子抑制色谱。 在反相色谱中,通过加入缓冲溶液调节流动相pH值,抑制组分解离,增加其k和tR,以达到改善分离的目的。 高效液相色谱法(HPLC) 实验条件的选择 检测器 UV或UVD:被测物有紫外吸收,流动相的截止波长小于检测波长。 FD:灵敏度高,荧光物质检测。 ELSD:挥发性低于流动相的组分,糖类等大分子。 ECD、RID、CLD等 高效液相色谱法(HPLC) 实验条件的选择 定量分析方法 一、外标法(同GC) 二、内加法 将待测物的纯品加入待测样品溶液中,通过测定该纯品加入前后组分峰高或峰面积的变化进行含量测定的方法。 高效液相色谱法(HPLC) 实验条件的选择 定量分析方法 一、外标法(同GC) 高效液相色谱法(HPLC) 实验条件的选择 定量分析方法 二、内加法 荧光分析法法 本身具有荧光或能转化为荧光的物质,如胺类、甾体、蛋白质、氨基酸和酶等 原子吸收分光光度法 呈源自状态的金属和部分非金属。中药材中重金属、毒害元素、微量元素等 * * ①
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