专题2.2.1_动物细胞培养和核移植技术解析.ppt

资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 3、体细胞核移植的过程 采集卵母细胞 供体奶牛 供体 细胞 供体细胞培养 MⅡ期 卵母细胞 无核卵 母细胞 去除卵母细胞核 将供体细胞注入去核卵母细胞 将胚胎移入代孕母牛（受体）体内 生出与供体奶牛遗传物质基本相同的牛犊 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 细胞融合 构建重组胚胎 无性生殖 显微操作法 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1)促进细胞融合的方法： ①物理方法： 电脉冲等。 ②化学方法： 钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等。 2)处理目的： 激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育过程。 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 例.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到（ ） A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术 D 讨论： 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。 * 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.制备单克隆抗体 4.细胞核移植 回顾： 动物细胞工程常用的技术手段： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 是其他动物细胞工程技术的基础。 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 1.动物细胞培养 如何进行细胞培养?培养时又需要提供哪些必要条件呢？ 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1.1概念 阅读课文44--46面相关内容： 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 阅读“动物细胞培养过程”并思考： 1、动物细胞培养的技术实施的原理是什么？ 特点是什么？ 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 6、简述动物细胞培养的操作过程。 1、动物细胞培养的技术实施的原理是什么？ 原理是:细胞增殖 （有丝分裂） 动物细胞生长特点： 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制 接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 接触抑制 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难。 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。 6、简述动物细胞培养的操作过程 分离组织（低幼动物） 分散细胞（胰蛋白酶） 原代培养（细胞增殖） 传代培养（细胞增殖） 分装 一、动物细胞培养 2、过程： 组织切块 剪碎用胰蛋白酶处理 培养液稀释 原代培养 胰蛋白酶处理分瓶培养 单个细胞 细胞悬液 贴