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分离DNA、PCR技术、分离蛋白质三者比较 [解析]　本题考查学生对教材实验的掌握。酵母菌和菜花细胞均为真核细胞，理论上均可作为提取DNA的材料；DNA既溶于2mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水，在2mol/L NaCl溶液中溶解度最大，在0.14mol/L NaCl溶液中溶解度最小；向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，是为了加速细胞膜和核膜破裂，此时玻棒上没有白色絮状物；鉴定DNA的原理是DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝。 [答案]　C 2．(2015·广东，3)关于DNA的实验，叙述正确的是(　　) A．用兔的成熟红细胞可提取DNA B．PCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步 C．DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物 D．用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色 [解析]　成熟的哺乳动物的红细胞没有细胞核和众多细胞器，不含DNA，不适于提取DNA，A错；PCR每个循环依次为变性、复性、延伸三步，B错误；DNA与二苯胺试剂混合，在沸水浴条件下呈蓝色，可以用来鉴定DNA，C正确；用甲基绿吡罗红试剂对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色。 [答案]　C 3．(2015·江苏，25)图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列叙述正确的是(　　) A．图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同 B．图1中完成过滤之后保留滤液 C．图2中完成过滤之后弃去滤液 D．在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 [解析]　图1加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，图2加入蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液，A错误；图1中加入蒸馏水后，DNA存在于滤液中，B正确；图2中加入蒸馏水后，NaCl溶液浓度降低，DNA析出，所以弃去滤液，C正确；嫩肉粉主要成分是蛋白酶，鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉可将蛋白质水解成小分子肽或氨基酸，除去蛋白质，D正确。 [答案]　BCD 4．(2015·山东，35)乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步 骤如下： (1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是________。从功能上讲，这种培养基属于________。 (2)培养微生物L前，宜采用________方法对接种环进行灭菌。 (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越________。 (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括________、________、离子吸附法及交联法等。 [解析]　(1)已知乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源，培养基中琼脂的作用是凝固剂，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。(2)为了避免杂菌污染，在培养微生物前，对接种环等接种工具应采用灼烧灭菌。(3)用电泳法纯化乳糖酶时，若在相同条件下分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越小，电泳速度越快。(4)固定化酶的应用价值与酶的活性(或活力)有关，因此用化学结合法固定化乳糖酶时，可通过检测固定化乳糖酶的活性(或活力)来确定其应用价值。酶的固定化方法包括化学结合法、包埋法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等。 [答案]　(1)乳糖　凝固剂　选择培养基 (2)灼烧 (3)小 (4)(酶)活性[或(酶)活力]　包埋法　物理吸附法(注：两空可颠倒) 专题五　DNA和蛋白质技术 成才之路 · 高中新课程 · 学习指导 ·人教版 · 生物 ·选修1 第一章　§1 成才之路 · 高中新课程 · 学习指导 · 北师大版 · 数学 · 必修1 成才之路 · 高中新课程 · 学习指导 ·人教版 · 生物 · 选修1 专题五　专题整合归纳 成才之路·生物 路漫漫其修远兮 吾将上下而求索 人教版 ·选修1 DNA和蛋白质技术 专题五 1.1.1　集合的概念 专题整合归纳 专题五 1.1.1　集合的概念 知 识 网 络 知 识 总 结 高 考 体 验 知 识 网 络 知 识 总 结 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 解决了DNA研究中材料不足的问题 为DNA研究打下基础 实验意义 相对分子质量及带电性质不同的蛋白质得以分离 获得大量DNA 获得较纯净的DNA 实验结果 样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定 变性→复性→延伸 选取材料→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 实验过程 依据相对分子质量的大小不同或带电性质差异来分离蛋白质 利用DNA热变性原理体外扩增DNA DNA在不同浓度