第三讲 酵母胞的固定化.docVIP

第三讲 酵母细胞的固定化 ★要点落实： 1．固定化酶 　（1）酶的应用：广泛应用于食品、化工、轻纺、医药等各个领域 （2）应用普通酶的缺点 　①在　　　　、　　　　、　　　　和有机溶剂等环境下容易失活 　②溶液中的酶很难回收，不能被　　　　，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中， 影响　　　　。 　（3）固定化酶的实例－高果糖浆的生产 ①反应机理：葡萄糖在 酶的催化下生成果糖。 　②反应柱：酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到柱内，柱子底端装上 分布着许多小孔的筛板， 无法通过小孔，而 溶液可 自由出入。 　③反应过程：将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定 化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从下端流出。 ④反应柱的优点：能 半年，大大降低成本，提高果糖的产量和质量。 2．固定化细胞 　（1）固定化技术：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术 　（2）固定化方法 ① 法：将酶或细胞包埋在不溶于水的多孔性载体中（或细微网格里）。 ② 法：将酶分子或相互结合，或将其结合到载体上。 ③ 法：将酶吸附到载体表面上 （3）固定化酶和固定化细胞的适用方法 ①酶更适合采用 和 法固定化，因为酶分子较小，容易从包 埋材料中漏出； ②细胞多采用 ，因为细胞体积大，难以被吸附或结合。 （4）常用的包埋细胞的多孔载体：明胶、琼脂糖、 、醋酸纤维素 和聚丙烯酰胺等 （5）固定化细胞的优点：与固定化酶相比， ， 。 ★要点突破：固定化技术 固定化技术的方法及适用对象等基础知识，以及固定化酵母细胞的操作要点及要注意的问题都是常考点，考生务必熟悉记牢。 【例1】酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的模式生物，生物兴趣小组对此进行了下列研究。请你根据他们的研究内容回答酵母细胞的固定化问题： （1）在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，原因是 。 （2）如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明 。 （3）本实验所用的固定化技术是包埋法，而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是 。 （4）利用固定化酵母细胞进行酒精发酵，与直接接种酵母菌相比较有哪些优点？（说出 两点） 、 。 答案：（1）防止高温杀死酵母菌；（2）固定化酵母细胞数目较少； （3）酶分子很小，容易从包埋材料中漏出； （4）能多次重复利用 降低生产成本 解析：（1）因为要将海藻酸钠与酵母细胞混合，酵母细胞是活细胞，需要适宜的温度，刚熔化的海藻酸钠温度过高，会杀死酵母细胞； （2）海藻酸钠为白色粉末，易溶于水，因此凝胶珠颜色的深浅主要与酵母菌的数量有关，酵母菌数量多，则颜色深，数量少则颜色浅； （3）酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，因为酶分子较小，容易从包埋材料中漏出。 ★跟踪训练 　 1．下列有关固定化酵母细胞制备步骤正确的是 A．应使干酵母与自来水混合并搅拌，以利于酵母菌活化 B．配制海藻酸钠溶液时要用小火或间断加热的方法 C．向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀 D．将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液注入CaCl2溶液中，会观察到CaCl2溶液中有球形或椭球形的凝胶珠形成 ★基础训练 一、单项选择 1．固定化细胞技术不包括 A．包埋法 B．化学结合化 C．物理法 D．生物法 2．固定化酶的优点 A．有利于增加酶的活性 B．有利于酶发挥作用 C．有利于提高反应速度 D．有利于产物的纯化 3．下列不是用于包埋法固定化细胞的载体是 A．聚乙烯树脂 B．醋酸纤维素 C．聚丙烯酰胺 D．琼脂糖 4．下列关于固定化酶技术的说法正确的是 固定化酶技术就是固定反应物将酶依附着载体围绕反应的技术 B固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应 C．固定化酶中的酶无法重复利用 D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术 ．下列固定化酵母细胞的制备步骤中不恰当的是 应使干酵母与水混合并搅拌，以利于酵母菌活化 B．配制海藻酸钠溶液时要用小火或间断加热的方法 C．向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母菌细胞，分搅拌并混合均匀 D将与酵母菌混匀的海藻酸钠溶液注入CaCl溶液中，会观到CaC溶液中有球形或椭球形的凝胶珠形成 二、非选择题 9．利用下列材料用具，验证固定化酵母细胞能发酵生产啤酒。 实验原理：麦芽汁可以渗入到由海藻酸钠和啤酒酵母制成的凝胶珠中。啤酒酵母可以利用自身细胞内的一系列酶将可发酵性糖转化成乙醇。 材料用具：麦芽汁液体培养基、新鲜斜面啤酒酵母、海藻酸钠、葡萄糖—氯化钙混合液，无菌水；高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、小烧杯、注射器、500ml三角瓶、天平、玻璃棒、pH试纸、纱布等。 实验步骤： ⑴ ⑵ ⑶ ★拓展训练 一、选择题 1．下列有关制