液相色谱原理程序.ppt

内容目录 1.前言 2.发展 3.理论发展简况 4.主要类型5.特点 6.流程与仪器 7.组成部分 8.分类 9.实例 一：前言 二：发展简史 1906年俄国植物化学家茨维特（Tswett）首次提出“色谱”（Chromotography）、“色谱图”（Chromatogram）和“色谱法”（Chromatographic method）的概念。他在论文中写到：一植物色素的石油醚溶液从一根主要装有碳酸钙吸附剂的玻璃管上端加入，沿管滤下，后用纯石油醚淋洗，结果按照不同色素的吸附顺序在管内观察到它们相应的色带，就象光谱一样，称之为色谱图。 三：液相色谱理论发展简况  四：主要类型 1．吸附色谱(Absorption?Chromatography) 2．分配色谱(Partition?Chromatography) 3．离子色谱(Ion?Chromatography) 4．体积排阻色谱(Size?Exclusion?Chromatography) 5．亲和色谱(Affinity?Chromatography) 五：特点 高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点： 〈1〉高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。 〈2〉高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。 〈3〉高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。  七：组成部分 1. 高压输液泵：（1）功能：驱动流动相和样品通过色谱分离柱和检测系统；（2）性能要求：流量稳定（±1?），耐高压（30－60Mpa），耐各种流动相 例如：有机溶剂、水和缓冲液；（3）种类：往复泵和隔膜泵。 八：分类 根据分离原理的不同，可分为：（一）液－液色谱法（或称液－液分配色谱法）（二）液一固色谱法（或称吸附色谱法）（三）离子交换色谱法（四）离子对色谱法（五）离子色谱法 （六）空间排阻色谱 九：实例 高效液相色谱法 学生:古力齐曼 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相，采用高压输液系统，是色谱法的一个重要分支。 它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。这种方法已成为化学、生化、医学、工业、农业、环保、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术，是分析化学、生物化学和环境化学工作者手中必不可少的工具。 30年代以后，相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。 1952年英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作，提出了关于气－液分配色谱的比较完整的理论和方法，把色谱技术向前推进了一大步，这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。 1958年基于Moore和Stein的工作，离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现，这是近代液相色谱的一个重要尝试，但分离效率尚不理想。 60年代中后期，气相色谱理论和实践的发展，以及机械、光学、电子等技术上的进步，液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。 70年代中期以后，微处理机技术用于液相色谱，进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。 90年代以后，生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展，为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题，如人类基因级计划，蛋白质组学有HPLC作预分离等。 高效液相色谱法(HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。 它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色