仪器在花色苷中的应用程序.ppt

仪器分析方法在花色苷研究中的应用 绪言 观赏植物的花色多种多样，花色主要是由花瓣中的色素类型决定，其中花的蓝紫色是由花色苷形成。在许多观赏性好、经济价值高的花卉中都缺乏蓝色系，如月季、香石竹、菊花等。因此，花色苷是目前花色研究的热点，内容涉及生化、生理和遗传学等多个方面。花色苷结构、性质的研究是花色苷研究的重要基础，本文主要介绍仪器分析方法在这项研究中的应用。 1 花色研究概况 色素的化学分析：类胡萝卜素、花色素苷、叶绿素、甜菜色素 花色变异机理 色素生物合成途径（基 因、关键酶） 分子育种改良花色 影响花色形成的主要因素 色素组成 助色素：黄酮醇、二氢黄酮等 金属离子：Al3+、Fe3+、Mg2+等 pH值 细胞结构和内环境 2 花色苷的化学结构和性质 2.1 花色苷化学结构 花色苷（anthocyanin）为黄酮类化合物，是由花色素和各种糖形成的配糖体。 花色素（anthocyanidin）是具有类黄酮典型结构的2-苯基苯并吡喃阳离子的衍生物，以 C6－C3－C6 为基本骨架，目前已知有20种花色素。 形成配糖体的主要的糖有：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、芸香二糖、龙胆二糖、槐二糖等。 花色素在3、5、7等位置与糖结合后形成糖苷，因此花色苷也相应地被分为单糖苷、二糖苷或三糖苷. 2.2 影响花色苷颜色稳定性的主要因素 花色苷的酰化作用： 有机酸如ｐ-香豆酸、咖啡酸和琥珀酸等通常与花色苷的3、5、7或3′位上的糖结合,形成单酰、二酰或多酰花色素苷。酰化花色苷参与分子内辅助着色或分子间辅助着色反应，是花色苷在较宽的pH值范围内颜色稳定表现。 pH值的作用： 在溶液介质中,花色苷会随pH有几种结构的变换。对于一个给定的pH值,在花色苷的4种结构之间存在着平衡:蓝色的醌式(脱水)碱、红色的花钅羊正离子、无色的甲醇假碱和查尔酮。 金属离子： 酰化花色素与辅助色素、金属发生反应,形成复合花色素苷。 研究的主要对象：羟基的位置和数量、糖的类型及位置、酰基化作用、取代基等 研究的主要方法：光谱法－－紫外可见光谱、红外吸收光谱，色谱法，核磁共振波谱法，质谱法 3 花色素苷的定性分析 3.1 光谱法 3.1.1 紫外可见光谱法 紫外-可见光谱很早就被人们应用于花色苷的结构鉴定。该法主要有如下几点： ①花色苷最大吸收波长一个在可见光区的500～540nm附近，另一个在紫外275nm附近，通过测定色素的最大吸收波长即可判断是否为 花色苷类色素。 ②如果向花色苷的0.01%盐酸甲醇溶液中滴加3～5滴ＡlＣl3甲醇或乙醇溶液,出现蓝移，即最大吸收波长增加，说明Ｂ-环有邻位酚羟基，即可区分Ｂ-环无邻位酚羟基的天竺葵色素、芍药色素、锦葵色素和Ｂ-环有邻位酚羟基的矢车菊色素、牵牛花色素、飞燕草色素。 ③根据花色苷最大吸收波长处的吸光度和440nm处的吸光度的比值Ａ440/Ａmax，参考文献后，可以判断糖苷的位置。 ④根据花色苷在300～330nm间有无吸收峰可判断该色素分子是否有酰基，如果有吸收峰，表明该色素有酰基存在。 ⑤根据花色苷在440nm处是否有肩峰，可以判断该色素5号位的羟基是否被取代。如果5号位的羟基没有被取代，则该色素在440nm处有肩峰。 ⑥根据花色苷在紫外光下是否有荧光，可判断该色素是否在5号位有取代基，如果有荧光则表明该色素在5号位有取代基。 3.1.2 红外吸收光谱 目前,红外吸收光谱应用于花色苷的结构鉴定不太广泛。花色苷的红外光谱主要有苯环、含氧杂环、糖和羟基和甲氧基四部分。 其中杂环的C＝O键的吸收峰在1630-1620cm-1，苯环和杂环的C一C键有三个吸收峰：Ⅰ：1605-1580cm-1，Ⅱ ：1577-1565cm-1，Ⅲ：1518-1485cm-1 。苯环C-H键的吸收峰在900-800cm-1，4-H:905－885cm-1，6-H:839-848cm-1，8-H:809一830cm-1。B环C-H键的吸收峰位置受取代基影响，不同的苷原也不相同。甲氧基和经基的吸收峰在1120-1010cm-1。花色苷的乙酞化产物的C=O键引起的峰在1654－1695cm-1。 3.2 色谱法 利用色谱法进行花色苷的结构鉴定需要对花色苷进行酸水解、碱降解和过氧化物降解等处理，使花色苷中的糖苷配基、糖和有机酸游离出来，再通过标准的糖苷配