2011~202仪器分析实验09生技(6个)教案.docVIP

仪器分析实验 教 案 2011~2012学年第一学期 实验一 、二 气相色谱分析实验 一、实验目的 一般了解气相色谱仪的用法和操作要点。； 初步学习利用气相色谱法进行定性和定量分析。 二、实验原理 在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留值、保留时间、保留体积、保留指数及相对保留值等保留参数。因此，在相同的色谱条件下，通过比较已知纯样和未知物的保留参数，即可确定未知物为何种物质。在一定色谱条件下，组分的质量或其在流动相中的浓度，与检测器的响应讯号峰面积或峰高成正比。 三、仪器与试剂 1． 仪器 GC9800型色谱仪 微量注射器 2． 试剂 苯； 甲苯； 乙苯； 正庚烷(若无G.C，A.R亦可) 四、实验内容： (一)苯、甲苯、乙苯、正庚烷混合液的气相色谱分析 1.参考条件 固定相 15%邻苯二甲酸二壬酯； 101酸洗白色担体 60-80目 柱长 2m 检测器 热导池 载气H2 20-30ml/min 柱温(t) 80-100℃ 桥流 150mA 气化室温度 120℃ 纸速 10mm/min 2.定性分析 用标准样品进样对照.分别将苯、甲苯、乙苯、正庚烷适量注入色谱仪，记下保留时间。再将混合试样注入色谱仪，记下各组分的保留时间。将各组分的保留值与纯祖分的保留值进行对照，如某一组分与标准样品的保留值相同，二者即有可能为同一物质，严格说来，则需用双柱定性较为可靠。 实验步骤： 1) 开载气 打开气源（按相应的检测器所需气体,如用FID则开 氮气，如用TCD则用H2作为载气）。 2) 开机 打开GC 9800电源开关。 3) 调节温度：柱箱 90℃ ；气化室 120℃ ；检测器(检2） 200℃； 按“柱箱”、“90”、“输入”则设置温度，其它以此类推，按“显示”可察看实际温度。 4) 升温 按“输入”、“运行”两键即可。 5) 点火 将氢气压力调到大于0.08MPa,空气在0.04MPa左右， 点好后将氢气调小到0.04MPa左右。 6) 进样 当各部位温度、压力稳定时按照实验内容使用微量进样器进样。 7) 熄火 实验完成后关闭氢气、空气阀。 8) 退温 按 “输入”、“退出”两键即可降温。 9) 关机 当各部位温度降至室温方可关机。 10）关载气 关闭氮气阀门。 3.定量分析 (1)相对校正因子的计算 准确称取苯、正庚烷、甲苯质量，以乙苯为溶剂混匀，取适量注入色谱仪，由各峰求得峰面积后，由下式计算甲苯、正庚烷的相对校正因子。(本实验选取苯为标准物质，设苯的相对校正因子f’0=1)。 f1 m1/A1 f’1= ——— = ———— f0 m0/A0 式中： m1，m0分别为组分重量与标准物的重量 A1，A0分别为组分峰面积与标准物的峰面积 (2)用内标法定量 选择苯作为内标物，要求内标峰与被测峰较靠近，且峰形相似，彼此能较好的分离。准确称取一定量的内标物苯、正庚烷、甲苯、乙苯混合液，混匀后重复进样二、三次，分别测出内标物和待测组分的峰面积，按下式计算各组分的含量 A1×m0 C1%= ———— ×f’1×100% A0×m 式中： m0，m分别为内标物和混合试样的重量 A0，A1分别为内标物和待测组分的峰面积 五、注意事项： 1．当检测器温度大于100℃时方可点火，以防冷凝水在检测头处产生； 2．温度调节好后可连续按“显示”键观察各部位实际温度； 3．点火时可用一铁片放在点火出口，如有水气则表明火以被点着，然后必须关小氢气流量； 4．进样前调基线，数据处理机上按“绘图”键，然后调“灵敏”旋钮调大小，将墨盒移至左边出来一点，调好后按“复位”键； 5．取样时微量进样器需反复清洗数次，进样时双手扶正以防针头弯曲。 实验三 乙酸的电位滴定分析及其离解常数的测定 一、实验目的 通过弱酸溶液离解常数的测定，正确掌握电位法测定溶液的pH值； 了解用pH计测离解常数的方法和原理。 二、实验原理 1． pH值的测定 当一个氢离子指示电极和一个参比电极共同浸在被测溶液中，构成一电池，两电极产生的电动势与