分子微生物学2013.3.26解决方案.ppt

转化因子是DNA。 第一节 基因表达调控的基本概念 二、基因表达的方式 1、组成性表达： 三、基因表达的规律 ——时间性和空间性 1、时间特异性（temporal specificity） 四、基因表达调控的生物学意义 增强子作用机理 转录激活结构域 酸性α-螺旋(acidicα-helix) 谷氨酰胺丰富区(glutamine-rich domain) 脯氨酸丰富区(proline-rich domain) 第三节 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 外界环境变化时 单细胞生物 —— 直接作出反应 多细胞生物 ——通过细胞间复杂的信号传递系统来传递信息，从而调控机体活动。 跨膜信号转导的一般步骤 特定的细胞释放信息物质 信息物质经扩散或血循环到达靶细胞 与靶细胞的受体特异性结合 受体对信号进行转换并启动细胞内信使系统 靶细胞产生生物学效应 细胞间信息物质是由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质的统称，又称作第一信使。 如生长因子、细胞因子、胰岛素等 第二信使(secondary messenger) 在细胞内传递信息的小分子物质，如：Ca2+、IP3、DAG、cAMP、cGMP等。 第四章 真核基因的表达与调控 真核生物的基因结构与转录活性 真核生物转录机器的组成 蛋白磷酸化对基因转录的调控 蛋白乙酰化对基因表达的影响 第一节 真核生物基因结构与转录活性 基因家族 真核基因的断裂结构 活性染色质的结构对转录的影响 DNA甲基化与基因活性的调控 真核生物基因表达调控的特点和种类 一、真核生物基因表达调控的特点 1、RNA聚合酶 真核生物有3种RNA聚合酶：RNA polⅠ、Ⅱ、Ⅲ。 每种RNA聚合酶有约10个亚基组成，其中TATA盒结合蛋白（TBP）为3种酶共有。 RNA polⅡ对催化mRNA的生成起主要作用。 转录前RNA polⅡ必须与TFⅡD等各种通用转录因子形成转录前复合体（PIC），才能激活或抑制RNA的转录。 真核生物基因表达调控的特点和种类 一、真核生物基因表达调控的特点 2、多层次 3、活性染色体结构变化：对核酸酶敏感 、DNA拓扑 结构变化 、DNA碱基修饰变化 、组蛋白变化 4. 转录与翻译分隔进行 5. 转录后修饰、加工 一、基因家族（gene family) 真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因，将这些基因称为基因家族。 如：编码组蛋白、免疫球蛋白和血红蛋白的基因都属于基因家族 同一家族中的成员有时紧密地排列在一起，成为一个基因簇(gene cluster) 。 二、断裂基因 基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，为非编码序列所隔开，其中编码的序列称为外显子，非编码序列称内含子。 外显子(Exon) ：真核细胞基因DNA中的编码序 列，这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质。 内含子(Intron) ：真核细胞基因DNA中的间插序列，这些序列被转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。 三、染色质结构与基因表达调控 按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质，所谓活性染色质是指具有转录活性的染色质；非活性染色质是指没有转录活性的染色质。 真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是裸露的DNA，因此染色质呈疏松或紧密结构，即是否处于活化状态是决定RNA聚合酶能否有效行使转录功能的关键。 活性染色质的主要特点 在结构上： 活性染色质上具有DNaseI超敏感位点 活性染色质上具有核基质结合区（MAR序列） 活性染色质上具有DNaseI超敏感位点。每个活跃表达的基因都有一个或几个超敏感位点，大部分位于基因5′端启动子区域。 完整的超敏位点是基因转录所必需的。 活性染色质上具有核基质结合区（ matrix attachment region ，MAR）。MAR一般位于DNA放射环或活性转录基因的两端。在外源基因两端接上MAR，可增加基因表达水平倍以10上，说明MAR在基因表达调控中有作用。是一种新的基因调控元件。 四、DNA的甲基化与基因调控： DNA的甲基化 DNA的甲基化能关闭某些基因的表达，而去甲基化则诱导基因的重新活化和表达； DNA的甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA的稳定性和DNA与蛋白质的相互作用。 CpG二核苷酸通常成串出现在DNA上，CpG岛 DNA甲基化抑制基因转录的机理 DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。 第二节真核生物转录机器的组成 真核基因的转录 增强子及其对转录的影响 反式作用因子 “基因”的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 1.启动子 顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非