微生物的实验室培养导学案(含答案).docVIP

课题1 微生物的实验室培养 基础知识 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对__营养物质 _的不同需求，配制出的供其___生长繁殖___的营养基质。 2.种类：按照培养基的物理性质划分 （1）___液体____培养基：配制成的____液体___状态的基质。 （2）__固体______培养基：在_____液体___培养基中加入___凝固剂__，如琼脂后，配制成的____固体___状态的基质，是实验室中最常用的培养基之一，微生物在其上面生长，可形成肉眼可见 的_____菌落____。 3.组成成分：各种培养基的具体配方_ 不同____，但一般都有_____水______、_____碳源______、_____氮源______、____无机盐_______，此外培养基还需要满足微生物生长对___PH________、_ ___特殊营养物质_______ 以及____氧气_______的需求。 二、无菌技术 获得纯净培养物的关键是_____防止外来杂菌的入侵________。 1．消毒是指使用____较为温和_____的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分__ __对人体有害______的微生物（不包括__芽孢__和__孢子____）。实验室常用的消毒方法有____煮沸消毒法______、____巴氏消毒法_____、____化学药剂消毒法____。 2.灭菌是指使用____强烈_____的理化因素杀死___物体内外所有_____的微生物，包括_____芽孢_____和_____孢子_____。常用的灭菌方法有____灼烧灭菌___、__干热灭菌__、___高压蒸汽灭菌____。 3.实验操作中避免杂菌的污染，主要包括四方面的内容： （1）对实验操作的__空间____、操作者的___衣着和手_____进行清洁和消毒。 （2）将用于微生物培养的__器皿__、___接种用具____和___培养基____等进行灭菌。 （3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____酒精灯火焰____附近进行。 （4）实验操作时应避免______已经灭菌处理____的材料用具与周围物品相接触。 4.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被_____微生物污染____。使用后的培养基丢弃前一定要进行____灭菌____处理，以免污染环境。 三、分离纯化大肠杆菌 本实验使用的培养基为_____牛肉膏蛋白胨_____培养基。进行大肠杆菌的纯化培养，可分为__ _制备培养基_____和______纯化大肠杆菌_________两个阶段。 1.制备培养基的一般步骤为：_____计算_____、____称量___、_____溶化_____、____灭菌______、_____倒平板______。 2.纯化大肠杆菌：微生物接种最常用的方法是____平板划线法_____和____稀释涂布法____。 （1）平板划线法通过_____接种环______在琼脂固体培养基表面连续___划线____的操作，将_____聚集_____的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 （2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的_____梯度稀释______，然后将不同稀释度的菌液_____分布涂布______到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 3.菌落的概念：_____由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体________。 4.结果分析： （1）如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明_______接种符合要求_______； （2）若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_______有杂菌未消化___________； （3）未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若长出菌落，则说明____培养基灭菌______不彻底，实验失败。 四、菌种保存 1.对于频繁使用的菌种，可以采用_______临时保藏________的方法。 （1）过程：首先将菌种接种到试管的_______固体斜面培养基上_____，合适温度下培养，菌落长成后，放于____4℃__冰箱中保藏，每隔3—6个月，都要将菌种从旧的培养基上转移到新的培养基上。 （2）缺点：保存时间_____短________，菌种容易被___污染________或产生_____变异____。 2.对于需要长期保存的菌种，可以采用______甘油管藏_______的方法，将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混匀于____-20℃____的冷藏箱内保存。 随堂练习 1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ①可以用相同的培养基　②都需要使用接种针进行接种　③都需要在火焰旁进行接种　④都可以用来计数活菌 A．①② B．③④C．①③ D．②④ ．下列有关微生物培养与应用