高等植物DNA提取重点.pptVIP

实验七 高等植物DNA的提取 一、实验目的 二、实验原理 植物细胞的DNA主要存在于细胞核中，称为核DNA或染色体DNA，细胞质中也有少量的DNA，主要分布在线粒体核叶绿体内，称为核外DNA。细胞内的各种DNA称为总DNA。 目前植物DNA的提取方法主要有: SDS法（十二烷基磺酸钠） CTAB法（十六烷基三甲基溴化铵） 植物细胞有细胞壁，在提取核DNA时首先要破坏细胞壁和核膜。 采用加石英砂与植物材料共同研磨的方法来破坏细胞壁； 用SDS（十二烷基磺酸钠）破坏细胞膜和核膜，并且使蛋白质变性，使蛋白质与核酸分离，通过离心就可以沉淀蛋白质； 为防止DNA被DNA酶降解，用EDTA（乙二胺四乙酸）可以螯合金属离子，抑制DNA酶的活性，使释放出来的DNA避免被降解； 得到的DNA溶液用Tris饱和酚反复抽提，进一步除去蛋白质和提纯DNA，最后用异丙醇沉淀DNA。 三、 实验材料，用具及试剂 （2）实验用具： 细胞提取液成分： SDS（十二烷基磺酸钠） EDTA （乙二胺四乙酸） 氯化钠溶液 50mmolL-1Tris-Hcl(PH=8.0) 四、实验方法 1、取鲜嫩的菠菜（去叶脉，留叶肉）50克，洗净后剪碎，放入