N 蛋白质合成.ppt

IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3.在IF-2和GTP的帮助下， fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 A U G 5 3 真核生物翻译起始的特点 ●核糖体较大,为８０Ｓ； ●起始因子比较多； ● mRNA 5′端具有m7Gppp帽子结构 ● Met-tRNAMet ● mRNA的5′端帽子结构和3′端polyA都参与形成翻译起始复合物； 真核生物翻译起始复合物形成(区别原核生物) 原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物（P120）。 met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 肽链延伸由许多循环组成，每加一个氨基酸就是一个循环，每个循环包括：AA-tRNA与核糖体结合、 肽键的生成 和 移位。 延伸因子(elongation factor, EF) ： 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 (三)肽链的延伸 1、AA-tRNA与核糖体A位点的结合 需要消耗GTP，并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子 通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物 EF-Tu-GDP+ EF-Ts EF-Tu-Ts + GDP EF-Tu-Ts + GTP EF-Tu-GTP + EF-Ts 重新参与下一轮循环 2、肽键形成是由转肽酶/肽基转移酶催化 3、移位 核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子。 需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 目 录 原核肽链合成终止过程 （四）肽链的终止 RF1：识别终止密码子UAA和UAG 终止因子 RF2：识别终止密码子UAA和UGA RF3：具GTP酶活性，刺激RF1和 RF2活性，协助肽链的释放 （原核生物） 真核生物只有一个终止因子（eRF） (五)蛋白质前体的加工 1、N端fMet或Met的切除 新生蛋白质经蛋白酶切后变成有功能的成熟蛋白质 2、二硫键的形成 两个半胱氨酸-SH -SH -SH 二硫键 氧化 3、特定氨基酸的修饰 磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化 4、切除新生肽链中非功能片段 前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图 (六)蛋白质合成抑制剂 五、蛋白质的运转机制 蛋白性质 运转机制 主要类型 分泌 蛋白质在结合核糖体上合成，并以翻译-运转同步机制运输 免疫球蛋白、卵蛋白、水解酶、激素等 细胞器发育 蛋白质在游离核糖体上合成，以翻译后运转机制运输 核、叶绿体、线粒体、乙醛酸循环体、过氧化物酶体等细胞器中的蛋白质 膜的形成 两种机制兼有 质膜、内质网、类囊体中的蛋白质 1、翻译-运转同步机制 信号肽假说 ●信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。 ●信号序列特点： （1）一般带有10-15个疏水氨基酸； （2）在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸； （3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。 新生蛋白质通过同步转运途径进入内质网内腔的主要过程 2、翻译后运转机制 (1)线粒体蛋白质跨膜运转 (2)叶绿体蛋白质的跨膜运转 （3）核定位蛋白的运转机制 * Many proteins that enter mitochondria or chloro