山东大学细胞10第十章试卷.pptVIP

第十章 线粒体与氧化磷酸化 *能量转换细胞器—ATP *半自主性细胞器—DNA 对线粒体认识过程： 1857年 Kollicker 首次观察：昆虫横纹肌 1888年 Kollicker 首次分离 1890年 Petzius 命名：肌粒(sarcosome） 1890年 Altman 命名：细胞质活粒（bioblast） 1897年 Benda 命名：线粒体（mitochondrion） 目录 第一节 线粒体的形态、大小与分布 第二节 线粒体的超微结构 第三节 线粒体的化学组成与酶的定位 第四节 线粒体的功能与氧化磷酸化 第五节 线粒体的半自主性 第六节 线粒体的发生 重点: 线粒体的超微结构 线粒体的能量转换功能 线粒体的半自主性 一、线粒体外膜 厚约6nm 膜上有小孔 孔蛋白（porin） 通透性高 通过分子 允许分子量5000以下的小分子通过， ATP、NAD（分子量小于1000）均可通过 三、外室（膜间隙） 内外膜之间——6-8nm 膜间隙与嵴内隙相通 内外膜接触处无膜间隙——蛋白质运输通道 含大量与氧化磷酸化有关的酶、底物 四、内室（线粒体基质） 蛋白质 酶：三羧酸循环、脂肪酸氧化、丙酮酸氧化 有形成分 丝状物质：环状DNA、RNA 核糖体：酵母—70S；哺乳动物—55S 致密颗粒状物质：Ca2+——磷酸钙沉淀—储存Ca2+ 脂类 第三节 线粒体的化学组成 与酶的定位 线粒体各部分的分离 线粒体的化学组成 线粒体中各种酶的定位 一、线粒体各部分的分离: 差速离心——完整线粒体 密度梯度离心——线粒体亚组分 低渗处理——吸水膨胀—分离外膜 去垢剂 外膜 *毛地黄苷—— 内膜和基质 （线粒体质体） *Lubrol——内膜与基质分开 二、线粒体的化学组成 蛋白质（各种酶）：含量：65%-70% 包括可溶性蛋白、不可溶性蛋白 脂类（磷脂等）：含量：25%~30% 核酸：DNA、RNA 内膜 蛋白质：脂类=4：1 外膜 蛋白质：脂类=1：1 三、线粒体中各种酶的定位 线粒体中约含120多种酶。主要为: 氧化还原酶：37% 合成酶：10% 水解酶：9% 内膜： 呼吸链 氧化磷酸化 基质: 柠檬酸循环酶类 脂肪酸氧化酶类 蛋白质合成酶类 各大组成部分有标志酶: 外膜: 单胺氧化酶 膜间隙: 腺苷酸激酶 内膜: 细胞色素氧化酶 基质: 苹果酸还原酶 起始凋亡的主开关 内膜：线粒体通透性转变孔（mtPTP） 膜间隙：死亡促进因子 细胞色素c 凋亡诱导因子（AIF） 切冬酶（caspase） 本节主要内容： 生物氧化的分区与定位 电子传递和氧化磷酸化的分子结构基础 氧化磷酸化的偶联机制 ATP的合成与穿膜机制 线粒体与疾病 一、 氧化磷酸化的过程（或分区） 蛋白、糖、脂 丙酮酸 乙酰CoA NADH 呼吸链 第一阶段（细胞质中） 第二阶段（基质中） 第三阶段（内膜 ： 提供一对电子和一个H+） 二、电子传递和氧化磷酸化的分子结构基础 氧化磷酸化与电子传递分别进行 ——2，4--二硝基苯酚——解偶联剂 实验证据：线粒体内膜重组实验——“亚线粒体小泡” 完整：具氧化磷酸化与电子传递作用 去掉基粒：只能电子传递，不能合成ATP 结论：电子传递链—内膜上；氧化磷酸化—基本颗粒 研究工具——亚线粒体小泡。 超声波 段 内外膜均破 内膜自然形成内翻外小泡 亚线粒体小泡 蛋白酶处理 ? 亚线粒体小泡 实验结论： 由NADH脱氢酶至细胞色素氧化酶的整个电子传递链存在于膜本身，而氧化磷酸化作用却由基本颗粒（ATP酶复合物）来承担。 总的分为四类： 黄素蛋白 电子传递链中NADH脱氢酶 TCA循环