蛋白分选与内膜系统分解.pptVIP

Heterogeneous vs. homogenous * 从突变体的表型中看到了，高尔基体作为蛋白的分选站，另一个去处是细胞外。 * 除了运送到胞外，还有一个重要贡献是把膜成分运送到细胞表面 * 调节型分泌举例 * Madin-Darby canine kidney MDCK cell line * * 体现了进化 * The Cell a molecular approach 5rd. Page561,为何用 125I，而不是35S * 膜泡的动态带来的研究困难，比如神经递质在Ca离子进入后的0.2ms内发生 * 病毒的融合，神经递质的释放 * 蛋白分选与 内膜系统 II 2014.4 突变体的应用 用酵母筛选突变体: 寻找蛋白分选发生异常的突变体，从而克隆蛋白分选过程有关的基因 共翻译转运方式进入内膜系统 翻译后转运方式进入？ 一.高尔基体之后的去向 1.溶酶体 lysosome 2.胞吐 exocytosis vs.胞吞（endocytosis 二.膜泡运输-运输机制 学习目的： 体会内膜系统的高度动态性 学习内容： 一.高尔基体之后 I.溶酶体是细胞的消化器（功能） 回收中心-清除无用大分子、 衰老细胞器其及损伤和死亡细胞 营养获取 防御功能-动物的吞噬细胞吞噬病原物 释放溶酶体酶到细胞外，参与细胞外消化 … 精子头部的顶体（acrosome）是特化的溶酶体，受精时与细胞质膜融合释放消化酶 a.溶酶体的结构生化特征： 膜的特征： 有H+ pump 膜蛋白有糖基化保护-抵御自消化 物质运输载体-用于消化产物运出 内部特征：溶酶体具备多种酸性水解酶：如酸性磷脂酶 溶酶体是异质性细胞器-动态的反映 初级溶酶体 次级溶酶体：由初级溶酶体与包含 待消化物质的膜泡融合而成 残余体： 溶酶体表现出的异质性 ？ 初级溶酶体 次级溶酶体 残余体 这一病例导致溶酶体酶分选途径的发现 待降解的物质堆积在溶酶体中 溶酶体中没有水解酶（溶酶体酶分泌到细胞外） 病人缺少正常的GlcNAC phosphotransferase 溶酶体贮积病-因缺少某种溶酶体酶而导致 待降解物质在溶酶体中堆积 如：Inclusion-cell I-cell disease 溶酶体疾病 b.溶酶体的发生-溶酶体酶的分选 II.胞吐 exocytosis 胞吐：通过膜泡与细胞质膜融合，将细胞内物质运到细胞外（完成分泌）或细胞质膜上 a.胞吐可调控性-两种分泌类型 组成型分泌：形成的分泌膜泡随即与细胞质膜融合，并释放物质 调节型分泌：形成的分泌膜泡暂存在细胞内，待细胞受到信号刺激后才往胞外分泌。如 ？ b. 胞吐的极性 两种病毒分别在细胞的两极出芽 -VSV水泡性口炎病毒 -流感病毒 同为高尔基体形成的分泌泡为何去向不同？ III.胞吞endocytosis 通过内吞作用将细胞外或质膜上物质摄取到细胞内 吞噬phagocytosis 胞饮pinocytosis　 注意胞吞、胞吐与溶酶体的关系 数据：胞吞胞吐导致质膜成分的不断周转 人体胰腺分泌细胞：90分钟 培养的巨噬细胞： 30分钟 a.吞噬 phagocytosis/cellular eating -吞入颗粒物 原生生物 -如Ameba获取营养 高等动物 -特化的细胞，主要是用于免疫和细胞更新 Neutrophil 中性粒细胞 Macrophage 巨噬细胞（吞噬1011个红细胞/天） 中性粒细胞 巨噬细胞 吞噬体 phagosome 溶酶体 lysosome 吞噬溶酶体 phagolysosome 残体 Residual body 吞噬相关过程 b.胞饮 pinocytosis/cellular drinking -吞入非颗粒，大分子与液体 卵细胞胞饮脂蛋白 c.特异性胞吞需受体介导 受体循环，继续利用 受体降解，如信号的脱敏 LDL：low-density lipoprotein 动物肝细胞合成胆固醇并组装成LDL;通过血液运输到其他细胞;细胞胞吞吸收利用 Familial Hypercholesterolemia FH 病人细胞无法吸收LDL 二、膜泡运输 步骤： 出芽 运输 融合 ？ 如何保证每一步的特异性 I.膜泡的形成-包被蛋白 cop I cop II clathrin 网格蛋白 注意： 包被蛋白作用的特异性 包被蛋白作用的瞬时性： 用于出芽时装配膜泡，形成膜泡后包被蛋白要去装配， 方能与靶膜融合； II.网格蛋白膜泡 介导高尔基体TGN向质膜、胞内体、 溶酶体或植物液泡的运输 网格蛋白膜泡的形成 dynamin 在膜泡脱落时 发挥作用 显示dynamin突变体中 网格蛋白膜泡无法脱落 dynamin